隨著基因工程技術(shù)的發(fā)展，病毒載體在目的基因的導(dǎo)入和表達(dá)中得到了廣泛應(yīng)用。由于其效率高、適用細(xì)胞種類多、瞬時(shí)表達(dá)等特點(diǎn)，已經(jīng)廣泛應(yīng)用于疫苗研發(fā)領(lǐng)域，對(duì)病毒顆粒數(shù)進(jìn)行實(shí)時(shí)的檢測(cè)是工藝中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，病毒的定量檢測(cè)對(duì)于疫苗的指導(dǎo)研發(fā)和質(zhì)量控制具有重要意義。
目前進(jìn)行病毒定量的方法主要是實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法（Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction , RT-qPCR），通過熒光定量的方法對(duì)模版拷貝數(shù)進(jìn)行定量， 每個(gè)模板的Ct值與該模板起始拷貝數(shù)的對(duì)數(shù)存在線性關(guān)系，利用已知起始拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)品可作出標(biāo)準(zhǔn)曲線，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析，從而反映完整病毒顆粒數(shù)。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR法目前已經(jīng)發(fā)展成為病毒定量檢測(cè)使用廣泛的技術(shù)之一，具有特異性好、靈敏度高、污染小等優(yōu)勢(shì)。但實(shí)時(shí)熒光定量PCR法前期體系構(gòu)建樣品制備繁瑣且不穩(wěn)定，極占實(shí)驗(yàn)員時(shí)間和精力的同時(shí)也影響定量結(jié)果。
睿科Vitae 100 全自動(dòng)化PCR體系構(gòu)建系統(tǒng)能夠?qū)崿F(xiàn)體系構(gòu)建流程自動(dòng)化，移液準(zhǔn)確且穩(wěn)定，實(shí)驗(yàn)結(jié)果滿足需求，解放雙手的同時(shí)保證了樣品檢測(cè)結(jié)果的可靠性。
整體實(shí)驗(yàn)流程
病毒顆粒數(shù)檢測(cè)（qPCR）整體實(shí)驗(yàn)流程
應(yīng)用場(chǎng)景
?？粕癁槟骋呙绻鞠俨《绢w粒數(shù)檢測(cè)提供自動(dòng)化體系構(gòu)建方案，具體方案如下：
實(shí)驗(yàn)流程
疫苗公司腺病毒顆粒數(shù)檢測(cè)自動(dòng)化體系構(gòu)建流程
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
樣品擴(kuò)增圖
標(biāo)準(zhǔn)曲線圖，根據(jù)主要Slope數(shù)值判斷曲線的點(diǎn)稀釋是否準(zhǔn)確，結(jié)果顯示，與客戶手動(dòng)操作的slope值（Slope=-3.376）一致，R2=0.999代表曲線偏離，標(biāo)準(zhǔn)曲線配置符合要求。
樣品擴(kuò)增圖，底部ROX所在區(qū)域越集中，即體系分裝越準(zhǔn)確。結(jié)果顯示，體系構(gòu)建分裝準(zhǔn)確，符合要求。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
Vitae 100全自動(dòng)PCR體系構(gòu)建系統(tǒng)
1、機(jī)械臂定位準(zhǔn)確到0.05mm，移液精確度CV≤2%，數(shù)據(jù)穩(wěn)定可靠；
2、儀器能有效解決疫苗研發(fā)過程中，樣品檢測(cè)和產(chǎn)品放行人工操作不穩(wěn)定的困境；
3、加樣過程自動(dòng)化，體系構(gòu)建全程用時(shí)25min，節(jié)省時(shí)間和人力；
4、配備紫外消毒燈和HEPA過濾裝置，保證操作安全性。
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