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Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)?elisa試劑盒的小知識

時間:2017-8-23閱讀:1601
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Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)?elisa試劑盒的小知識

I型前膠原羧基端前肽(carboxyterrninal propeptide of type Ipmcollagen, PICP)是骨組織中惟一的膠原,占骨基質(zhì)的90%以上。血清中I型前膠原羧基端前肽的水平是反映成骨細(xì)胞活動和骨形成以及反映I型膠原合成速率的特異指標(biāo)。它可以被肝臟吸收,通過上皮細(xì)胞甘露糖受體結(jié)合而被清除,所以易受肝功能的影響。


I型前膠原羧基端前肽的正常值:50-200ug/L


測定I型前膠原羧基端前肽的研究意義表現(xiàn)在I型前膠原羧基端前肽增高:見于兒童發(fā)育期、妊娠zui后3個月、骨腫瘤,特別是前列腺癌骨轉(zhuǎn)移、畸形性骨炎、酒精性肝炎和肺纖維化等。I型前膠原羧基端前肽降低:見于絕經(jīng)期后骨質(zhì)疏松樣本經(jīng)雌激素治療6個月后可降低30%,但其降低的機(jī)制尚不清楚。

Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)?elisa試劑盒的小知識

實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。

1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。

為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液 100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37,60分鐘。

3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。

4.每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液) 100μl,37℃,60分鐘。

5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。

6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。

1、操作簡單、快速。所有操作步驟,都有圖譜示意,讓你簡單明了,不必為研究操作步驟而耽擱時間。

2.靈敏度高。 酶是一種有機(jī)催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng) ,產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。我們的試劑盒實現(xiàn)了在ug、ng、pg水平上對其進(jìn)行定量。

3.特異性強(qiáng)。特異性來自抗體或抗原的選擇性。采用的*抗體抗原,保證的試劑盒品質(zhì)。

4.性價比高,質(zhì)量穩(wěn)定。

5.樣品所需量少。

如果需要了解該產(chǎn)品詳細(xì)信息歡迎大家。

Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)?elisa試劑盒的小知識

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