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07
2017年
09月 -
獻給初學(xué)者，基因功能研究時，如何在細(xì)胞內(nèi)過表達(dá)基因？
進行基因功能研究時，如能包含信號通路無疑會提升故事的深度和完整性。研究信號通路很重要的一個手段是過表達(dá)基因，觀察表型變化。今天就向大家介紹一個過表達(dá)基因的技術(shù)——過表達(dá)載體的構(gòu)建。下面就從目的基因調(diào)取、引物設(shè)計、過表達(dá)質(zhì)粒構(gòu)建詳細(xì)說明。以人pyrin基因、pWPI-eGFP過表達(dá)質(zhì)粒為例，構(gòu)建慢病毒過表達(dá)載體pWPI-eGFP-pyrin。一、pyrin基因序列的調(diào)取進入NCBI數(shù)據(jù)庫（http://www.ncbi.nlm.nih.gov），選擇pyrin種屬來源，如人選擇基因亞型，需查閱文獻【查看全文】
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07
2017年
09月 -
不讓您寶貴的克隆留下“疤痕”！提起傳統(tǒng)酶切連接克隆或載體構(gòu)建，什么讓大家苦不堪言？小A：每次都要糾結(jié)于各種限制性內(nèi)切酶的選擇。小B：操作步驟繁瑣，耗時長，至少需三四天才能完成。小C：每次只能克隆1個目的片段。小D：片段結(jié)合位置上有時會留下“疤痕”?！ぁぁぁぁぁね浛嚯y，今天小編給大家介紹一種新的克隆方法—一步法同源重組技術(shù)，帶你們脫離苦惱！一步法同源重組是一種利用同源重組的原理，進行無縫克隆的技術(shù)。該技術(shù)無需考慮酶切位點，幾乎適用于任何載體與任何片段的定向克隆。操作過程簡單快速，只需50℃，20【查看全文】
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21
2017年
08月 -
抗擊支原體保護珍愛的“TA”細(xì)胞界一場侵略與反侵略戰(zhàn)正如火如荼上演著……首先讓小編介紹一下這場戰(zhàn)役起因“TA”（細(xì)胞）受到支原體的侵略導(dǎo)致生長變慢、狀態(tài)變差，雖不會馬上致死，但會影響其機體內(nèi)的各種參數(shù)，如改變膜抗原性、改變新陳代謝、干擾核酸的合成、影響DNA轉(zhuǎn)染效率、導(dǎo)致染色體畸變等。參與者細(xì)胞：我們zui珍貴的“TA”支原體：又稱霉形體，直徑為0.1~0.3μm，是目前發(fā)現(xiàn)的zui小、zui簡單的原核生物，呈現(xiàn)高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分支狀等多種形態(tài)，可透過濾膜，混入細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)中，通【查看全文】
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21
2017年
08月 -
NF90/NF110對環(huán)形RNA表達(dá)調(diào)控和功能作用的新機制
【文獻解讀】陳玲玲研究組合作發(fā)現(xiàn)NF90/NF110對環(huán)形RNA表達(dá)調(diào)控和功能作用的新機制Yeasen一步法克隆試劑盒助力陳玲玲課題組再發(fā)高分文章，揭秘環(huán)形RNA表達(dá)調(diào)控和功能作用的新機制今天跟大家分享一篇來自MolecularCell的文章，講述的是抗病毒免疫相關(guān)的NF90和NF110，通過結(jié)合兩側(cè)內(nèi)含子配對序列進而促進環(huán)形RNA產(chǎn)生的機制，并闡明環(huán)形RNA通過與NF90/NF110的競爭性結(jié)合在抗病毒免疫過程中發(fā)揮重要功能作用。研究組系統(tǒng)揭示了順式元件－內(nèi)含子互補配對序列對環(huán)形RNA表達(dá)的關(guān)【查看全文】
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04
2017年
08月 -
技術(shù)部-產(chǎn)品文獻引用-HB170802
一、分子類1.qPCRmix[1].Liu,C.,etal.,Enrichmentａndfluorogeniclabellingof5-formyluracilinDNA[J].ChemicalScience,2017.8:p.4505-4510.（IF8.668）[2].Nie,W.,etal.,Three-dimensionalporousscaffoldbyself-assemblyofreducedgrapheneoxideａndnano-hydroxyapatitecomposites【查看全文】
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02
2017年
08月 -
多樣本直接PCR系列專題MoreGenotyping,LessTimeandFewerReagentsPCR-basedGenotyping等實驗，常需純化樣本基因組。當(dāng)待測樣本較多時，純化基因組的過程費時、操作重復(fù)，并且實驗成本高。翊圣生物通過改造TaqDNA聚合酶，優(yōu)化PCR反應(yīng)體系開發(fā)出無需基因組純化的DirectPCRKit系列產(chǎn)品。CleverPCR：DirectPCR翊圣DirectPCRKit是直接從樣本開始，以未經(jīng)基因組純化的微量原始樣本（圖1-A）或其裂解產(chǎn)物（圖1-B）作為模【查看全文】
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31
2017年
07月 -
凋亡早期檢測——Annexin-V呈現(xiàn)檢測結(jié)果一背景介紹細(xì)胞凋亡（Apoptosis）一般是指機體細(xì)胞在發(fā)育過程中或在某些因素作用下通過細(xì)胞內(nèi)基因及其產(chǎn)物的調(diào)控而發(fā)生的一種程序性細(xì)胞死亡過程。細(xì)胞凋亡途徑中各事件的發(fā)生是有時序性的，即各事件按先后順序依次發(fā)生，zui終導(dǎo)致凋亡小體的出現(xiàn)，細(xì)胞隨后發(fā)生凋亡。凋亡早期在正常細(xì)胞中，磷脂酰絲氨酸（Phosphotidylserine,PS）位于細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)，但在早期凋亡的細(xì)胞中，PS由細(xì)胞膜的內(nèi)側(cè)翻轉(zhuǎn)到細(xì)胞膜表面，暴露在細(xì)胞外環(huán)境中。Annexin-Ⅴ（【查看全文】
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25
2017年
07月 -
【小翊實驗手帳】TheChoiceofRT-qPCR：One-steporTwo-step作為一個進實驗室不久的實驗小白，zui近實驗室?guī)熜中沦徺I了一步法定量試劑，而我一直使用的是“先反轉(zhuǎn)錄再定量”，那一步法定量試劑又是什么鬼？為了跟上大師兄的腳步，不拖實驗室后腿，我學(xué)習(xí)總結(jié)了以下材料。實時定量PCR（QuantitativeReal-TimePCR，即qRT-PCR或qPCR），是對基因和基因轉(zhuǎn)錄水平（即RNA）定量的重要方法。對于RNA的定量，需反轉(zhuǎn)錄（ReverseTranscriptio【查看全文】
