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  • 漲知識 | qPCR專場二:如何獲取高質量的cDNA模板?

    熒光定量PCR是實驗室中出鏡率非常高的一種檢測方法。該方法通過在PCR體系中添加熒光基團來記錄DNA產(chǎn)物的累積情況,從而達到對PCR過程進行實時監(jiān)控的目的,并且可以通過數(shù)據(jù)分析計算出起始模板量,這就是“熒光定量”中“定量”一詞的來源。熒光定量PCR實驗因為靈敏度高所以經(jīng)常是差之毫厘謬以千里,所以在實驗過程中,我們需要注意諸多細節(jié),謹慎操作。小伙伴們看到這里就要著急了,我怎樣才能做好qPCR實驗,拿到實驗結果,發(fā)表高分文章,走上人生呢?對于熒光定量PCR反應體系而言,cDNA模板的質量至關重要。c
  • 干貨分享 | 分子克隆從載體到篩選全解析

    克隆是英文“clone”或“cloning”的音譯,而英文“clone”則起源于希臘文“Klone”,原意是指以幼苗或嫩枝插條,以無性繁殖或營養(yǎng)繁殖的方式培育植物,如扦插和嫁接。1963年J.B.S.Haldane在題為“人類種族在未來二萬年的生物可能性”的演講上采用“克?。–lone)”的術語,把“克隆技術”帶到了人們的視野中,其本身的含義是無性繁殖??寺〖夹g又稱為“生物放大技術”,它經(jīng)歷了三個發(fā)展時期:01微生物克隆時期即用一個細菌可以很快復制出成千上萬個和它一模一樣的細菌,從而變成一個細菌
  • Smart-seq3xpress:更低成本、更高通量的單細胞測序技術

    單細胞轉錄組測序可以研究細胞內(nèi)RNA轉錄本的異質性和復雜性,揭示組織/器官/生物體內(nèi)不同細胞類型的組成和功能,目前在胚胎發(fā)育、細胞分化、神經(jīng)科學、腫瘤免疫等領域都有重要的應用?;赟MART(Switchingmechanismatthe5′endoftheRNAtemplate)技術的Smart-seq2是主要的單細胞測序技術之一,具有高靈敏度、全長轉錄本覆蓋度、可檢測到稀有轉錄本等特點,應用場景廣泛。圖1.Smart-seq2技術流程圖[1]但基于平板的Smart-seq2技術,分析通量低且
  • 護航全流程!宿主核酸殘留去除與檢測完整方案

    護航全流程!宿主核酸殘留去除與檢測完整方案·背景介紹·近年來,生物制品已應用到生物醫(yī)藥、生物農(nóng)業(yè)、生物能源、生物制造、生物環(huán)保等多種領域。隨著生物制品的市場占比越來越大,針對生物制品,國家和相關部門也建立起規(guī)范的質量管理體系和標準,其中宿主細胞核酸殘留問題是備受關注的焦點之一。生物制品如重組蛋白藥、抗體藥、疫苗、細胞與基因藥物等產(chǎn)品是用連續(xù)傳代的菌種株/細胞株表達的,因而產(chǎn)品內(nèi)可能會殘存宿主核酸。殘留的宿主細胞核酸可能引發(fā)細胞因增殖失控變?yōu)槟[瘤細胞,也有可能存在感染性病毒基因從而加劇體內(nèi)免疫反應
  • Exonuclease I:特異性去除單鏈DNA,PCR引物去除的選擇

    核酸外切酶I(ExonucleaseI)是一種對變性或單鏈脫氧核糖核酸具有高度選擇性的核酸外切酶,作用時,ExonucleaseI從單鏈聚脫氧核糖核苷酸的3羥基端開始攻擊,隨后逐步釋放出脫氧核糖核苷5'-單磷酸鹽,但末端二核苷酸會保持完整,對雙鏈DNA或RNA無活性。常用于在Sanger測序或SNP分析之前去除PCR反應中的單鏈引物、去除巢式PCR中的單鏈引物、PCR產(chǎn)物酶法純化、從核酸混合物中去除含有3'羥基末端的單鏈DNA等。圖1.ExonucleaseI降解單鏈DNA示意圖翌圣的Exonu
  • 免費試用 | 經(jīng)培養(yǎng)類器官驗證的高活性HiActi™細胞因子

    免費試用|經(jīng)培養(yǎng)類器官驗證的高活性HiActi™細胞因子2021年,類器官被列為“十四五”國家重點研發(fā)計劃重點專項。類器官如此火熱,其獲得方式也成為目前關注的焦點。不同類器官在培養(yǎng)過程中所需的細胞因子是不同的。通過添加促進或抑制特定信號通路的細胞因子,可以讓干細胞分化成需要的類器官。類器官培養(yǎng)中的細胞因子培養(yǎng)方案為WNER(分別代表:Wnt-3a、Noggin、EGF和R-Spondins),這4種因子的增減組合可以適用于幾乎所有的類器官培養(yǎng)實驗。類器官培養(yǎng)常用細胞因子R-Spodin1功能:R
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    精品推薦|Hifair系列高效反轉錄試劑,助力合成高質量cDNA如何做好反轉錄,拿到高質量的cDNA,做出漂亮的實驗結果呢?在這其中不僅僅要把控好操作的細節(jié),選好適合的反轉錄試劑也很重要!翌圣反轉錄試劑類型目前翌圣匠心研發(fā)的反轉錄試劑大體分為兩類,分別為反轉錄試劑盒和反轉錄預混液。反轉錄試劑盒:產(chǎn)品中Oligodt引物和隨機引物單獨成管,可根據(jù)實驗需求,引物靈活調(diào)整,針對特定基因片段、miRNA、siRNA等其他特殊目標RNA時,可選用自己設計合成的特異性引物。反轉錄預混液:產(chǎn)品中Oligodt
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