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上海哈靈生物科技有限公司>技術文章>細胞N-乙基馬來酰亞胺敏感性融合蛋白ATP酶活性光度法

技術文章

細胞N-乙基馬來酰亞胺敏感性融合蛋白ATP酶活性光度法

閱讀:1263          發(fā)布時間:2016-7-22

主要用途

       我公司細胞N-乙基馬來酰亞胺敏感性融合蛋白ATP酶(NSF ATPase)活性光度法定量檢測試劑是一種旨在使用ATP酶、丙酮酸激酶乳酸脫氫連續(xù)循環(huán)法反應系統(tǒng),敏感性抑制劑N-乙基馬來酰亞胺存在與否的情況下,受到鈉鉀ATP酶水解產(chǎn)生的ADP過程中,伴隨的還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的氧化反應, 即采用光度法測定其氧化后吸光峰值(NADH濃度)的變化,以此進行測算單位酶活性而經(jīng)典的技術方法。該技術經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適合于各種來酰亞胺敏感細胞(動物、人體、昆蟲等)裂解懸液N-乙基馬性融合蛋白ATP酶的特異性活性檢測。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定,反應優(yōu)化,檢測敏感。

注意事項

  • 本產(chǎn)品為20次操作(比色皿;10個樣本)或80次(96孔板;40個樣本),包括背景對照測定
  • 操作時,須戴手套
  • 系統(tǒng)操作過程中,背景測定只需1次
  • 建議樣品忌用磷酸緩沖溶液等,可以使用SUCROSE、IMIDAZOLE等  
  • 加入樣品啟動反應后3秒內即刻光度測定
  • 如果測定初期,背景對照吸光讀數(shù)不穩(wěn)定,表明體系均衡溫度不理想,建議樣品加入前孵育由3分鐘延長至5分鐘
  • 反應測定值由高到低變化;測定可以持續(xù)60分鐘
  • 測定值由高到低變化,即0分鐘測定讀數(shù)高于60分鐘測定讀數(shù),表明有酶活性
  • 光度測定后,比色皿須清洗*
  • 建議待測樣本蛋白濃度為50至100微克/50微升;如果樣本酶活性過低或過高,則可以增加或降低樣本量;注意計算公式的調整(本公司提供 BCA蛋白質濃度定量試劑盒30031.1)
  • 樣品特異活性是指N-乙基馬來酰亞胺敏感的NSF ATP酶
  • N-乙基馬來酰亞胺敏感性融合蛋白ATP酶活性單位濃度定義:在37℃溫度下,pH 9.0條件下,每分鐘內能夠氧化1微摩爾還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)所需的酶量作為一個活性單位
  •  
  • 本公司提供系列ATP酶類分析技術產(chǎn)品

如:

   組織N-乙基馬來酰亞胺敏感性融合蛋白ATP酶(NSF ATPase)活性光度法定量檢測試劑盒

   酵母N-乙基馬來酰亞胺敏感性融合蛋白ATP酶(NSF ATPase)活性光度法定量檢測試劑盒

   植物N-乙基馬來酰亞胺敏感性融合蛋白ATP酶(NSF ATPase)活性光度法定量檢測試劑盒

   N-乙基馬來酰亞胺敏感性融合蛋白ATP酶(NSF ATPase)轉運功能檢測試劑盒

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