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技術(shù)文章

過(guò)氧化物酶測(cè)試盒操作指南

閱讀:621          發(fā)布時(shí)間:2024-11-21

哈靈生物樣本測(cè)試前的準(zhǔn)備與操作步驟

1. 哈靈生物樣本預(yù)試與稀釋在哈靈生物樣本測(cè)試前,選擇兩例預(yù)期差異最大的樣本至關(guān)重要。通過(guò)稀釋這些樣本,我們可以找到最佳的樣本濃度,以確保測(cè)定OD值(吸光度)時(shí),對(duì)照OD值位于0.2至0.4的范圍內(nèi),這是最佳濃度的指示。

  • 稀釋比例:推薦進(jìn)行5倍、10倍和20倍的稀釋。

  • 目的:比較不同稀釋倍數(shù)下的樣本對(duì)OD值的影響,確定最佳稀釋倍數(shù)。

2. 哈靈生物測(cè)定吸光度稀釋后的樣本可以通過(guò)哈靈生物分光光度計(jì)測(cè)定其吸光度。哈靈生物酶標(biāo)儀是另一種常用的儀器,可以快速測(cè)量96孔板中各孔的吸光度。

  • 操作步驟:反應(yīng)完成后,吸取200μL反應(yīng)液加入96孔板中。

  • 波長(zhǎng)選擇:在哈靈生物酶標(biāo)儀中,選擇420nm(±10nm)波長(zhǎng)讀取吸光值。

  • 光徑:光徑約為0.576cm,這是一個(gè)大概值,用于計(jì)算吸光度時(shí)的參考。

3. 哈靈生物試劑三的濃度調(diào)整在哈靈生物分光光度計(jì)下,使用240nm紫外波長(zhǎng)對(duì)試劑三進(jìn)行濃度調(diào)整。

  • 比色皿選擇:使用1cm光徑的石英比色皿讀取吸光度。

  • 吸光度目標(biāo):當(dāng)吸光度達(dá)到0.4左右時(shí),認(rèn)為試劑三濃度合適。

  • 材質(zhì)重要性:石英材質(zhì)比色皿對(duì)紫外光透過(guò)性好,保證測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性。非石英材質(zhì)可能影響測(cè)量結(jié)果。

哈靈生物實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)

  • 精確操作:確保樣本準(zhǔn)確稀釋、試劑精確配制、儀器正確使用。

  • 結(jié)果分析:仔細(xì)分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果,確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和實(shí)驗(yàn)的有效性。

  • 實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ):通過(guò)細(xì)致的工作,確保實(shí)驗(yàn)成功,為后續(xù)研究提供堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。


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