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技術文章

細胞色素P450酶系總活性熒光定量檢測試劑盒產品說明書

閱讀:2890          發(fā)布時間:2016-8-25

細胞色素P450酶是肝細胞微粒體復合功能單加氧化酶系統(tǒng)的總稱。其分成五十多個亞酶:CYP1至CYP51。作用在于體內外源化合物(xenobiotics),包括藥物、致癌劑、化學污染物的氧化代謝,即單加氧化作用(monooxygenation)和羥化作用(hydroxylation)。

 

您需要準備:

1.5毫升離心管:用于標準樣品配制和反應的容器

培養(yǎng)箱:用于孵育反應

200微升1厘米光徑比色皿或黑色96孔板:用于熒光分析的容器

 

熒光分光光度儀過熒光酶標儀:用于熒光分析

  • 準備好待測樣品(例如細胞裂解萃取液或微粒體樣品等),置于冰槽里
  • 設定好熒光分光光度儀(溫度為37℃):激發(fā)波長370nm,散發(fā)波長450nm,并置零 
  • 準備好5個1.5毫升離心管,標記為1至5號管
  • 分別加入25微升緩沖液(Reagent A)到每個離心管
  • 移取25微升標準液(Reagent E)到1號管,混勻
  • 小心移取25微升1號管稀釋的標準液(Reagent E)到2號管,混勻
  • 小心移取25微升2號管稀釋的標準液(Reagent E)到3號管,混勻
  • 小心移取25微升3號管稀釋的標準液(Reagent E)到4號管,混勻
  • 將1至5號管放進冰槽里備用,避免光照;標準管濃度見下表

?   計算方式:

    【根據標準曲線獲得樣品對應羥基香豆素濃度(微摩爾/升)×0.2(體系容量;毫升)×樣品稀釋倍數(shù)】÷【0.02(樣品容量;毫升×15(反應時間;分鐘)】=納摩爾/毫升/分鐘÷(樣品蛋白濃度)毫克/毫升=納摩爾/毫克/分鐘

 

  • 本產品經鑒定性能穩(wěn)定
  • 本產品經鑒定檢測敏感

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