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在elisa實(shí)驗(yàn)中Z可能出現(xiàn)問(wèn)題以及解決方法

閱讀:744          發(fā)布時(shí)間:2013-10-24
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        我們常說(shuō)到的elisa是酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定的簡(jiǎn)稱,它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來(lái)的一種免疫酶技術(shù)。elisa技術(shù)自70年代初問(wèn)世以來(lái),發(fā)展十分迅速,到目前為止已經(jīng)被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域之中。

        在試驗(yàn)中可能會(huì)出現(xiàn)所有孔都沒(méi)有顯色,那么原因就有可能是微孔加入抗體后,洗板不*,微孔中存在游離的抗體。也可能是用錯(cuò)試劑。您在想想是不是在操作中忘記加酶或抗體。       
 所有孔都沒(méi)有顯色的問(wèn)題解決方法:       
1、檢查洗板器械,比如洗板機(jī)管道是否堵塞、洗液是否用完。         
2、在加樣前,要看清瓶簽。         
3、嚴(yán)格按說(shuō)明書操作步驟進(jìn)行實(shí)驗(yàn),確保每步都到位。         

        您有沒(méi)有遇見過(guò)所有孔顯色偏低的現(xiàn)象?那么氣原因就有可能是微孔加入抗體后,洗板不*,微孔中存在游離的抗體?;蛘呤窍窗宀桓蓛?。抗體污染了酶結(jié)合物等其它試劑。溫度沒(méi)達(dá)到要求也會(huì)受到相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)影響。還有可能是每孔加入的試劑量低于說(shuō)明書要求量。   
所有孔顯色偏低的問(wèn)題解決辦法:    
(1)手工加蒸餾水洗板時(shí),要避免吸頭接觸微孔,常更換新的蒸餾水。   
(2) 洗板時(shí)要確保每孔都注滿蒸餾水(約400ul),且至少洗板五次。     
(3)嚴(yán)格按說(shuō)明書要求操作,每次取樣要更換吸頭。     
(4) 控制孵育溫度在25℃。      
(5) 加樣器吸頭安放牢固避免吸樣不足,加樣時(shí)務(wù)必將吸頭內(nèi)液體打盡。 
  

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