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ELISA試劑盒檢測方法的原理
閱讀：2598發(fā)布時間：2016-6-20
目前，酶聯(lián)免疫（ELISA試劑盒）檢測技術廣泛用于免疫學、微生物學、寄生蟲學等。由于其具有靈敏度高、試劑穩(wěn)定、設備簡單、操作安全等優(yōu)點，近幾年也將其應用到食品領域中來檢測某些食品中的生理活性物質。
酶聯(lián)免疫吸附法（elisa試劑盒檢測方法）原理：
原理：ELISA可用于測定抗體，也可用于檢測杭原。其基本原理是采用抗原與抗體的特異反應將待測物與酶連接，然后通過酶與底物產(chǎn)生顏色反應，用于定量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。3種必要的試劑： ①固相的抗原或抗體（免疫吸附劑）； ②酶標記的抗原或抗體（標記物）； ③酶作用的底物（顯色劑）。
ELISA過程包括：抗原吸附在固相載體上，這個過程稱為包被，加待測抗體, 再加相應酶標記抗體，生成抗原--待測抗體--酶標記抗體的復合物，再與該酶的底物反應生成有色產(chǎn)物。借助分光光度計的光吸收計算抗體的量。
根據(jù)檢測目的和操作步驟不同，有以下三種類型的常用方法：
1.間接法
此法是測定抗體zui常用的方法。將已知抗原吸附于固相載體。加人待檢標本（含相應抗體）與之結合。洗滌后，加人酶標抗球蛋白抗體（酶標抗抗體）和底物進行測定。
2.雙抗體夾心法
此法常用于測定抗原。將已知抗體吸附于固相載體，加人待檢標本（含相應抗原）與之結合。溫育后洗滌，加人酶標板中。
3.競爭法
此法可用于抗原和半抗原的定量測定，也可用于測定抗體。以測定抗原為例，將特異性抗體吸附于固相載體。加入待測抗原和一定量的酶標已知抗原，使二者竟爭與固相抗體結合；經(jīng)過洗滌分離，zui后結合于固相的酶標抗原與待測抗原含量呈負相關。
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