聯(lián)系電話
上海北諾生物科技有限公司
中級會員·14年
- 聯(lián)系人：
- 周經理 劉經理
- 電話：
- 021-57730393
- 手機：
- 15800960770
- 傳真：
- 86-021-61496710
- 地址：
- 上海市徐匯區(qū)宜山路520號中華門大廈18樓D座
- 個性化：
- www.bnbiotech.com
掃一掃訪問手機商鋪
1. 在6孔板中接種1~3×105細胞/孔，加入2ml*培養(yǎng)基，置CO2孵箱中37℃培養(yǎng)過。
2. 待細胞長到50-80%單層時，在無菌離心管中配制如下溶液：
i. 溶液A：將4?g待轉染的超純DNA稀釋到250?l無血清培養(yǎng)基中，靜置5min
ii. 溶液B：將2-25?l LipofectAMINE 稀釋到250?l無血清培養(yǎng)基中，靜置5min
3. 混合溶液A和B，輕輕混勻，室溫放置15-45min。
4. 用2ml無血清培養(yǎng)基輕輕洗滌細胞，加入0.8ml無血清培養(yǎng)基/孔，將脂質體復合物滴加到孔中，輕輕搖晃混勻，置CO2孵箱中37℃孵育2-24hr。
5. 用*培養(yǎng)基替換轉染液，繼續(xù)培養(yǎng)。
6. 24-72hr后檢測蛋白質的表達或傳代并加入選擇性抗生素以篩選穩(wěn)定表達株。
