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將制備好的siRNA,siRNA表達載體或表達框架轉(zhuǎn)導至真核細胞中的方法主要有以下幾種:
為了達到高的轉(zhuǎn)染效率,在轉(zhuǎn)染實驗過程中,需要注意以下幾點:
微量的RNA酶將導致siRNA實驗失敗。由于實驗環(huán)境中RNA酶普遍存在,如皮膚,頭發(fā),所有徒手接觸過的物品或暴露在空氣中的物品等,此保證實驗每個步驟不受RNA酶污染非常重要。
3.健康的細胞培養(yǎng)物和嚴格的操作確保轉(zhuǎn)染的重復性
針對siRNA制備方法以及靶細胞類型的不同,選擇好的轉(zhuǎn)染試劑和優(yōu)化的操作對siRNA實驗的成功至關重要。