首頁(yè) >> 公司動(dòng)態(tài) >> ELISA試劑盒操作過(guò)程中可能出現(xiàn)的問(wèn)題和解決方法
| 問(wèn)題 | 可能原因 | 解決方法 |
|---|---|---|
| 顯色淡，靈敏度偏低 | 1、試劑盒在運(yùn)輸途中時(shí)間太長(zhǎng)，溫度太高 | 盡量縮短運(yùn)輸時(shí)間，夏季應(yīng)放冰塊降溫 |
| 2、試劑盒未充分平衡 | 試劑盒從2～8℃冰箱取出后打開(kāi)盒蓋，于室溫平衡至少20分鐘，確保所有試劑已平衡至室溫（約25℃）。 | |
| 3、培養(yǎng)箱溫度不足37℃ | 注意培養(yǎng)箱溫度，放入反應(yīng)板后盡量減少開(kāi)啟次數(shù)以免影響溫度恒定，非隔水式培養(yǎng)箱尤其應(yīng)注意 | |
| 4、保溫時(shí)間不足 | 校正定時(shí)鐘準(zhǔn)確定時(shí) | |
| 5、洗滌時(shí)沖擊力太大、浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、洗滌次數(shù)增加 | 按說(shuō)明書(shū)要求保留洗滌時(shí)間，準(zhǔn)確記住洗滌次數(shù) | |
| 6、移液器吸液量不足，吸嘴內(nèi)壁掛水太多或內(nèi)壁不清潔 | 校正移液器，吸嘴要配套，裝吸嘴時(shí)要緊密，吸嘴內(nèi)壁要清潔，一次性使用 | |
| 7、蒸餾水水質(zhì)有問(wèn)題 | 使用新鮮合格的蒸餾水 | |
| 8、底物作用時(shí)間不足 | 準(zhǔn)確定時(shí) | |
| 背景深，全部呈有色, | 1、洗滌不充分，洗后未拍干，樣品中其它成分殘留或酶標(biāo)記物殘留 | 濃縮洗液準(zhǔn)確配制；10倍濃縮洗滌液如有結(jié)晶則應(yīng)讓結(jié)晶于室溫全部溶解后再量取稀釋；充分洗滌，*拍干。加樣或加酶拍板的濾紙應(yīng)棄去不用，不要反復(fù)使用，否則易造成污染 |
| 2、樣品污染 | 樣品應(yīng)新鮮采集，或低溫保存，防止污染 | |
| 3、培養(yǎng)箱溫度超過(guò)37℃或反應(yīng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng) | 調(diào)整培養(yǎng)箱溫度，準(zhǔn)確定時(shí) | |
| 4、吸嘴重復(fù)使用，未洗凈或消毒不* | 吸嘴盡可能一次性使用 | |
| 5、蒸餾水被污染 | 使用新鮮蒸餾水 | |
| 6、酶等試劑混用 | 不同批號(hào)試劑勿混用 | |
| 7、一次實(shí)驗(yàn)的標(biāo)本量過(guò)多，加樣時(shí)間太長(zhǎng)，導(dǎo)致實(shí)際反應(yīng)時(shí)間延長(zhǎng) | 合理安排實(shí)驗(yàn)，避免幾塊酶標(biāo)板同時(shí)加樣 | |
| 重復(fù)性不佳 | 1、樣品數(shù)量多少不一，加樣時(shí)間有長(zhǎng)有短 | 重復(fù)某一樣品時(shí)，加樣時(shí)間盡可能與*次接近 |
| 2、保溫時(shí)間不一致，洗滌條件不一致，操作人員不一致 | 重復(fù)測(cè)定標(biāo)本，操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致，以排除這些因素造成的不一致的可能性 | |
| 3、加樣量不一致 | 樣品稀釋前應(yīng)充分混勻，盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴 | |
| 出現(xiàn)白板，陽(yáng)性對(duì)照不顯色 | 顯色液變質(zhì) | 更換新的顯色液 |
| 洗滌液配制有誤 | 請(qǐng)按說(shuō)明書(shū)所示稀釋倍數(shù)配制 | |
| 未加酶結(jié)合物而認(rèn)為已加入 | 注意不要漏加 | |
| 終止液誤作洗滌液稀釋或當(dāng)?shù)孜镆菏褂?/td> | 每次加液前均應(yīng)看清標(biāo)簽 |
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
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