細胞名稱：HeLa 人宮頸癌細胞

別名：HeLa細胞，人宮頸癌細胞系

種屬：人

組織來源：宮頸腺癌

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

培養(yǎng)條件：

培養(yǎng)基類型：D-MEM 培養(yǎng)基

FBS: 10%

抗生素：雙抗

培養(yǎng)條件：37℃，CO2: 5%

傳代方法：

收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態(tài)：

如果沒長滿，將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內(nèi)更換新鮮培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。

如果細胞已經(jīng)長滿（約80%-90%）則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。

貼壁細胞傳代方法：

1 棄去培養(yǎng)基，用不含鈣、鎂離子的PBS 洗1-2 次。

2 加1ml 0.25%的胰酶（含0.02%EDTA），讓胰酶與大部分細胞接觸后放入37℃培養(yǎng)箱內(nèi)，隨時觀察細胞狀態(tài)變化，待細胞大部分變圓后加*培養(yǎng)基終止消化。

懸浮細胞傳代方法：可以直接傳代也可以離心法傳代。

1 直接傳代是讓懸浮細胞慢慢沉淀在瓶底后，將上清吸掉1/2-2/3，吹打細胞形成細胞懸液后，分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

2 離心法傳代是將細胞連同培養(yǎng)液一并轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，1000rpm，

5 分鐘，去除上清，加新的培養(yǎng)液到離心管內(nèi)，吹打細胞形成細胞懸液后，分別接種到其他培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

一般沒有特殊說明，細胞一般是一傳二。

凍存方法：

70% *培養(yǎng)基，20%FBS，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

儲存：液氮中長期保存。

注：

1 觀察細胞在低倍鏡下觀察，便于整體估計細胞密度。

2 在運輸過程中可能會導(dǎo)致一些貼壁不牢的細胞發(fā)生部分脫落，可

離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng)。

3 收到細胞后若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、細胞污染等，請在一周內(nèi)與我們

。

來源：慧穎細胞實驗室

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：王