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ELISA試劑盒血標(biāo)本在采集處理時應(yīng)小心

閱讀:95          發(fā)布時間:2014-7-8

ELISA試劑盒血標(biāo)本在采集處理時應(yīng)小心

    因此,在冰箱中保留不易過久。在酶聯(lián)免疫測定尤其是間接ELISA試劑盒中,試劑的特異性取決于使用抗原的純度。標(biāo)本凝集不全時,血清中會殘留部門纖維蛋白原,也易造成假陽性。ELISA試劑盒檢修標(biāo)本中含有酶標(biāo)記物的干擾物,內(nèi)源性干擾物類風(fēng)濕因子(RF)、黃疸等,類風(fēng)濕因子是可作用于多種動物以及人IgGFc段的自身抗體,多數(shù)為IgM類,能充當(dāng)抗原成分與固相及酶標(biāo)抗體反應(yīng),從而呈現(xiàn)非特異性顯色。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP(辣根過氧化酶),有海內(nèi)報道酶免HBsAg試劑檢測溶血標(biāo)本時可造成假陽性。影響ELISA試劑盒中非特異性顯色的原因良多,如ELISA試劑盒特異性、檢修標(biāo)本中含酶標(biāo)記物的干擾物,

    因此,在選擇ELISA試劑盒同時要對其使用的微孔板型號進(jìn)行認(rèn)證,評估。試劑盒特異性因素固相載體的選擇,ELISA試劑盒中常用的固相載體有微量滴定板、小珠和小試管三種,以微量滴定板zui為常見。外源性干擾物,經(jīng)常因樣品采集、貯存、處理不當(dāng)造成如樣品溶血,被細(xì)菌污染,標(biāo)本凝集不全等。如在冰箱中保留過久,其中的IgG可發(fā)生聚合,在間接法ELISA試劑盒中可使本底加深。但因為受方法學(xué)及技術(shù)前提的限制,在酶聯(lián)吸附測定中有時不可避免的會泛起一定的非特異性,但我們可以通過以上措施把非特異性顯色降至zui低限底,從而進(jìn)步檢測的特異性,并得到更正確、可靠的實驗結(jié)果。酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)自1971年自問世以來,以其敏感性高,特異性強(qiáng),操縱簡便、安全,而廣泛應(yīng)用于臨床診斷,開創(chuàng)了免疫學(xué)診斷的新紀(jì)元。

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