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撫生試劑-適的免疫方案對于細(xì)胞融合雜交

閱讀:66          發(fā)布時間:2014-6-25

適的免疫方案對于細(xì)胞融合雜交

   選擇獲得高質(zhì)量的McAb至關(guān)重要。免疫方案應(yīng)根據(jù)抗原的特性不同而定,重組表達(dá)的p24抗原屬于可溶性抗原,分子質(zhì)量約24kDa,免疫原性弱,一般要加佐劑。常用佐劑有福氏*佐劑和福氏不*佐劑兩種。要求抗原和佐劑等體積混合在一起,研磨成油包水的乳糜狀,放一滴在水面上不易馬上擴(kuò)散成小滴狀表明已達(dá)到油包水的狀態(tài)。商品化福氏*佐劑在使用前需振搖,使沉淀的分枝桿菌充分混勻。
    
初次免疫  抗原1~50ug加福氏*佐劑皮下多點、腳掌注射
               ↓(一般O.8~1m1 O.2ml/點)
                  2~3周后
第二次免疫  劑量同上,加福氏不*佐劑皮下或腹腔注射
               ↓(劑量不宜超過o.5m1)
                  2~3周后
第三次免疫  劑量同上,加福氏不*佐劑,腹腔注射
               ↓(5~7天后采血測其效價,檢測免疫效果)
                  2~3周后
加強(qiáng)免疫    劑量同上,不加佐劑,尾靜脈注射或腹腔注射
    
               ↓3天后
              取脾融合

目前,用于可溶性抗原(特別是一些弱抗原)的免疫方案也不斷進(jìn)步,例如,①將可溶性抗原顆粒化或固相化,一方面增強(qiáng)了抗原的免疫原性,另一方面可降低抗原的使用量;②改變抗原注入的途徑,基礎(chǔ)免疫可直接采用脾內(nèi)注射;③使用細(xì)胞因子作為佐劑,提高機(jī)體的免疫應(yīng)答水平,促進(jìn)免疫細(xì)胞對抗原的反應(yīng)性。

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