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技術(shù)文章

染色原理及作用

閱讀:659          發(fā)布時間:2016-5-30

   ELISA試劑盒染液由酸性染料伊紅和堿性染料美藍組成的復合染料,溶于甲醇 ,后解離為帶正電的美藍和帶負電的伊紅離子。染色法就是用染色液對細菌進行染色。那么染色原理是什么?
    染色原理:
    染料是由堿性染料美藍( Methvlem blue )和酸性染料黃色伊紅( Eostm Y )合稱伊紅美藍 染料即 (美藍-伊紅Y)染料。伊紅鈉鹽的有色部分為陰離子,無色部分為陽離子,其有色部分為酸性,故稱伊紅為酸性染料。美藍通常為氯鹽是堿性的,美藍的中間產(chǎn)物結(jié)晶為三氯化鎂復鹽,其有色部分為陽離子,無色部分為陰離子,恰與伊紅鈉鹽相反。
    為了觀察細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu),識別各種細胞及其異常變化,血涂片必須進行染色。染色法是血細胞分析zui經(jīng)典和zui常用的染色法。 細胞的各大種成分均由蛋白質(zhì)構(gòu)成,由于蛋白質(zhì)是兩性電解質(zhì),所帶正電荷的數(shù)量隨溶液pH而定。對某一蛋白質(zhì)而言,如環(huán)境pH<pI,(pI為蛋白質(zhì)的等電點),則該蛋白質(zhì)在酸性環(huán)境中正電荷增多,易與伊紅結(jié)合,染色偏紅;相反,當環(huán)境的pH>pI,即在堿性環(huán)境中負電荷增多,易與美藍結(jié)合,染色偏藍。臨床上常用緩沖液(pH6.4~6.8)來調(diào)節(jié)染色時的pH值,同時還應(yīng)注意使用清潔、中性的玻片,的甲醇配制染液,以期達到滿意的染色效果。
    染色的染料配方濃度對細胞核著色程度適中,細胞核結(jié)構(gòu)和色澤清晰艷麗,對核結(jié)構(gòu)的識別較佳,但對胞漿著色偏酸,色澤偏紅,對細胞漿內(nèi)顆粒特別是嗜天青顆粒及嗜中性顆粒著色較差。
    染液染色鑒定
    或姬姆薩染色液鑒定:剛配好或放置一個月以上的染液可進行下列鑒定:
    1.取1滴染液于乳白玻板上,自行迅速擴散開,其顏色變紫紅色,且有偽足形成。
    2.取1滴染液加1滴緩沖液,染液由深藍色立即變?yōu)樽霞t色。
    3.取血片或骨髓片進行試染檢查,觀察染色后各類細胞的胞核、胞漿及顆粒著況,pH是否合適及染色合適時間。如有上述變化,表明染液合格,可供使用。
    以上為染色原理,染色是目前zui常用而又zui簡單的染色方法。試劑中之酸性伊紅和堿性美藍混合經(jīng)化學作用后,變成中性之 伊紅化美藍,久置后,經(jīng)氧化而含有天青。此三種染料分別和細胞核及漿中的NH3+和COO-等結(jié)合,使細胞核及胞漿著色。由于系中性染料,又有緩沖液調(diào)節(jié)酸堿度,所以細胞受染后,藍紅等顏色都較適中,核染質(zhì)、胞漿及其中之顆粒顯色較為清楚。

SCN4B    鈉通道亞基β4抗體
STIM1    基質(zhì)交感分子1抗體
Serum amyloid A 4 protein    血清淀粉樣蛋白4抗體
SPON2/    細胞外基質(zhì)底物反應(yīng)蛋白2抗體
SLU7    SLU7蛋白抗體
Signal Peptide Peptidase    信號肽肽酶SPP抗體
SRD1    類固醇5α還原酶1抗體
14-3-3 family protein    蘋果14-3-3蛋白抗體
SPRR1a    角質(zhì)蛋白α抗體
SPRR3    角質(zhì)蛋白β抗體
Sidekick 1    細胞粘附分子伴侶蛋白1抗體

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