在環(huán)境監(jiān)測(cè)和污染治理領(lǐng)域，對(duì)水體中有機(jī)物的準(zhǔn)確分析具有至關(guān)重要的意義。隨著科技的發(fā)展，熒光分光光度計(jì)作為一種先進(jìn)的儀器分析方法，為有機(jī)物的定量分析提供了新的途徑。本研究旨在探討使用F93熒光分光光度計(jì)進(jìn)行水體中有機(jī)物分析的可行性。
一、材料與方法
1.1儀器與試劑
F93熒光分光光度計(jì)；鄰苯二甲醛(OPA)、巰基乙醇、硼酸鹽緩沖液(pH 8.5)、標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)溶液(牛血清白蛋白)均購(gòu)自Sigma-Aldrich公司。實(shí)驗(yàn)用水為超純水。
1.2實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1樣品處理
將水樣通過(guò)0.45μm濾膜過(guò)濾，取5 mL濾液加入100μL OPA(10 mmol/L)，混勻后于40℃反應(yīng)10 min，用熒光分光光度計(jì)進(jìn)行測(cè)定。
1.2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制
取6支試管，分別加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)溶液(牛血清白蛋白)，加入緩沖液至1 mL，于40℃反應(yīng)10 min，用F93熒光分光光度計(jì)進(jìn)行測(cè)定。以熒光強(qiáng)度為縱坐標(biāo)，牛血清白蛋白濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
二、結(jié)果與討論
2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍
根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，繪制熒光強(qiáng)度與牛血清白蛋白濃度之間的關(guān)系曲線(圖1)。可以看出，在0～10μg/mL范圍內(nèi)，熒光強(qiáng)度與牛血清白蛋白濃度呈良好的線性關(guān)系，線性方程為y=2.57x+1.24(R²=0.99)。這表明使用F93熒光分光光度計(jì)進(jìn)行水體中有機(jī)物分析具有可行性。
圖1熒光強(qiáng)度與牛血清白蛋白濃度之間的關(guān)系曲線
(請(qǐng)?jiān)诖颂幉迦霟晒鈴?qiáng)度與牛血清白蛋白濃度之間的關(guān)系曲線圖)
2.2方法的精密度和準(zhǔn)確度
取實(shí)際水樣，分別加入低、中、高濃度的標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)溶液，按照實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行處理和測(cè)定。結(jié)果表明，該方法的精密度和準(zhǔn)確度均較高(表1)。相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)在2.8%～4.1%之間，回收率在85%～95%之間。這表明該方法具有較好的精密度和準(zhǔn)確度，能夠滿足實(shí)際水樣中有機(jī)物的分析需求。
