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豬腫瘤壞死因子α(TNF-α)定量檢測(cè)試劑盒(ELISA)

2012-6-18  閱讀(1376)

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【試劑盒名稱(chēng)】
豬腫瘤壞死因子α(TNF-α)定量檢測(cè)試劑盒(ELISA)
【試劑盒用途】
定量檢測(cè)豬血清、血漿及相關(guān)液體樣本中腫瘤壞死因子α(TNF-α)的含量。
【檢測(cè)原理】
本試劑盒采用雙抗體兩步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本加入到預(yù)
先包被豬腫瘤壞死因子α(TNF-α)單克隆抗體透明酶標(biāo)包被板中,溫育足夠時(shí)間后,洗滌除
去未結(jié)合的成分,再加入酶標(biāo)工作液,溫育足夠時(shí)間后,洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入
底物A、B,底物(TMB)在辣根過(guò)氧化物酶(HRP)催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色產(chǎn)物,在酸的作用
下變成黃色,顏色的深淺與樣品中豬腫瘤壞死因子α(TNF-α)濃度呈正相關(guān),450nm 波長(zhǎng)下
測(cè)定OD 值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的OD 值,計(jì)算樣本中豬腫瘤壞死因子α(TNF-α)含量。
【試劑盒組成】
備注:標(biāo)準(zhǔn)品(1 號(hào)→6 號(hào))濃度依次為:200、100、50、25、12.5、6.25 ng/L.
【需要而未提供的試劑和器材】
1、37℃恒溫箱
2、標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
3、精密移液器及一次性吸頭
4、蒸餾水
5、一次性試管
6、吸水紙
【操作步驟】
1、準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平衡30 分鐘。
2、配液:用蒸餾水將20 倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。
3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本:取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板,固定于框架上,分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、
待測(cè)樣本孔和空白對(duì)照孔,記錄各孔位置,在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL;待測(cè)樣本孔中先
1 酶標(biāo)包被板12 孔×8 條7 顯色劑A 液6mL
2 標(biāo)準(zhǔn)品0.3mL×6 管8 顯色劑B 液6mL
3 20 倍濃縮洗滌液25mL 9 終止液6mL
4 樣本稀釋液6mL 10 說(shuō)明書(shū)1 份
5 特殊稀釋液6mL 11 封板膜2 張
6 酶標(biāo)試劑6mL 12 密封袋1 個(gè)

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