藥篩自動(dòng)化先鋒
CyBio FeliX助力細(xì)胞活力檢測
背景:
基于細(xì)胞表型的藥物篩選是當(dāng)前藥篩的重要方法,是將擬設(shè)計(jì)的藥物所作用的靶細(xì)胞為研究對象,去評估藥物對細(xì)胞活力的影響,這是更接近生理?xiàng)l件的藥物篩選模型,可以很好地模擬藥物在體內(nèi)的作用情況。 主要方法是應(yīng)用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲取所需細(xì)胞,將這些細(xì)胞與候選化合物相互作用,通過顯微鏡或酶標(biāo)儀收集產(chǎn)生的信號,測定化合物的作用能力,從而對化合物進(jìn)行篩選。
1. 需要進(jìn)行大量化合物的篩選,人工操作工作效率低;
2. 每個(gè)化合物都要進(jìn)行技術(shù)重復(fù),人工加樣誤差大;
3. 基于細(xì)胞表型的化合物篩選對于環(huán)境潔凈度有很高的要求。
為解決以上難題,德國耶拿CyBio FeliX攜手Promega RealTime-Glo™ MT 細(xì)胞活力檢測試劑盒打造自動(dòng)化實(shí)時(shí)細(xì)胞活力檢測平臺。CyBio FeliX不僅可以降低人工操作在移液工作中帶來的差異,保證精確度;減少用戶投入實(shí)驗(yàn)的時(shí)間和精力,提高整體工作效率,協(xié)助快速篩選藥物;且德國耶拿CyBio FeliX的無外殼型號主機(jī)可以直接放進(jìn)生物安全柜,滿足細(xì)胞實(shí)驗(yàn)所需要的高潔凈度要求。
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì):
使用Promega的 RealTime-Glo™ MT 細(xì)胞活力檢測試劑盒,并利用 CyBio-FeliX進(jìn)行移液工作,對喜樹堿(一種 DNA 拓?fù)洚悩?gòu)酶 I 抑制劑,以劑量依賴性方式誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡)以4倍稀釋倍數(shù)連續(xù)稀釋8次,每個(gè)濃度做6個(gè)重復(fù),進(jìn)行 3 次獨(dú)立的細(xì)胞活力測定(A、B、C)。 使用的細(xì)胞是U2-OS細(xì)胞(人骨肉瘤上皮貼壁細(xì)胞)。記錄處理后的第 24、30 和 48 小時(shí)的發(fā)光情況。繪制每次測定的 log10[喜樹堿] 的細(xì)胞存活率百分比。報(bào)告每個(gè)獨(dú)立測定(A、B、C)和每個(gè)孵育時(shí)間的回歸變量以及測定批內(nèi)的變異系數(shù)。
圖1 基于Promega的RealTime-Glo™ MT 細(xì)胞活力檢測試劑盒搭配德國耶拿CyBio FeliX全能型移液工作站進(jìn)行實(shí)時(shí)細(xì)胞活力檢測的工作流程圖。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
圖2在CyBio-FeliX上進(jìn)行自動(dòng)RealTime-Glo™ MT細(xì)胞活力測定結(jié)果圖譜,R^2^值表示回歸與實(shí)際數(shù)據(jù)的擬合,且通常接受的批內(nèi) CV% 值為 ≤10%。
根據(jù)結(jié)果可得,CyBio FeliX能夠很好地完成實(shí)時(shí)細(xì)胞活力檢測實(shí)驗(yàn)中的移液工作,結(jié)果的精確度在可接受范圍內(nèi)。說明在CyBio FeliX的助力下,不僅消除了繁瑣多變的手動(dòng)液體處理工作,為研究人員提供了無人值守的便利,同時(shí)還能產(chǎn)生一致且可重復(fù)的結(jié)果。
CyBio FeliX全能型移液工作站
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