您好, 歡迎來到化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品分類品牌分類
-
混勻儀|混合器 氣體發(fā)生器 分光測色計(jì) 勻漿機(jī) 研磨機(jī) 超凈工作臺(tái) 洗板機(jī) 高低溫試驗(yàn)箱 恒溫金屬浴 電阻爐 溶劑過濾器 漩渦混合儀|旋渦混勻儀 均質(zhì)器 水槽 恒溫水槽 手套 培養(yǎng)板 生物安全柜 天平 滴定管 瓶口分液器 光澤儀 錐入度儀 濁度計(jì) 分析儀 冷藏保存箱 色差儀 超純水機(jī) 預(yù)制冷槽 油浴槽 冷卻水循環(huán)裝置 溶媒回收裝置 恒溫水浴槽 液氮罐 馬弗爐 酶標(biāo)儀 培養(yǎng)箱 電泳儀 潔凈工作臺(tái) 干燥箱 磁力攪拌器 滅菌器 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 低溫冰箱 防爆冰箱 離心機(jī) 振蕩器 移液器 真空泵
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證基因功能
閱讀：1083 發(fā)布時(shí)間：2023-6-21
一、實(shí)驗(yàn)材料： 疾病對(duì)應(yīng)的細(xì)胞系（或者是原代細(xì)胞），預(yù)算充足情況下可以選擇2種細(xì)胞系，暫定為：A和B細(xì)胞
二、實(shí)驗(yàn)方案：敲低兩種細(xì)胞的目的基因1、過表達(dá)兩種細(xì)胞的目的基因1（若是miRNA可以使用mimics、inhibitor）
三、干擾片段篩選：2種細(xì)胞都需要篩選（當(dāng)用mimics和inhibitor時(shí)也需要初步篩選表達(dá)效果）
目的基因1干擾片段篩選：針對(duì)目的基因1設(shè)計(jì)并合成3條siRNA及NC，轉(zhuǎn)染細(xì)胞，QPCR篩選出干擾 的片段進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)；
四、實(shí)驗(yàn)分組：A或B細(xì)胞
A
A+siRNA NC對(duì)照組
A+siRNA目的基因1干擾
A+過表達(dá)目標(biāo)基因1
A+過表達(dá)空載
抑制劑處理濃度1
五、檢測項(xiàng)目：
細(xì)胞增殖或者細(xì)胞毒性檢測（CCK法/MMT），
流式檢測細(xì)胞周期，
流式檢測細(xì)胞凋亡，
細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)（transwell），遷移、劃痕
WB檢測細(xì)胞信號(hào)通路中蛋白的表達(dá)變化，
QPCR檢測信號(hào)通路中基因的表達(dá)，
免疫熒光檢測下游信號(hào)通路蛋白
流式多色檢測某些marker指標(biāo)
Coip檢測A和B蛋白是否結(jié)合
雙熒光素酶檢測A和B是否結(jié)合
油紅O染色
生化檢測：SOD，CAT等
透射電鏡