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熒光全功能分光光度計在RNA質(zhì)控的應(yīng)用
對于每天泡在實(shí)驗(yàn)室的人來說，qPCR已是家常便飯。毫無疑問濃度高，純度好，片段完整，才是我們理想中的RNA樣品。然而，RNA總是嬌氣的存在！室溫或4度極易降解，提取的時候容易有污染物殘留。因此完整的RNA質(zhì)控包含了三個方面：濃度質(zhì)控，純度質(zhì)控，片段完整性質(zhì)控。
如何把控RNA質(zhì)量，繼續(xù)反轉(zhuǎn)錄呢？
有一款RNA質(zhì)控的高手，既可以提供RNA濃度質(zhì)控，也可以提供RNA純度質(zhì)控，沒錯，就是美國Denovix公司提供的DS-11FX超微量紫外/熒光全功能分光光度計，看上去酷酷的
RNA純度質(zhì)控的標(biāo)準(zhǔn)方法是超微量分光光度計（光吸收）法，通過監(jiān)控A260/230和A260/280的比值來判定RNA的純度。通常A260/280的比值范圍在1.8-2.0之間，如果大于2.0則說明RNA已經(jīng)降解，如果低于1.8則說明含有蛋白質(zhì)或其他雜質(zhì)；而A260/230的比值如果小于2，則表明RNA中含有酚類，鹽等雜質(zhì)。DS-11FX的微量光度計功能可以幫助科研人員來準(zhǔn)確的判定RNA樣品的純度。
下圖為RNA紫外法檢測示意圖，A260/280和A260/230都不在正常的比值范圍，說明RNA樣品純度很差，儀器會自動進(jìn)行提示，兩個黃色小三角就是警示圖標(biāo)哦，點(diǎn)擊萌萌的黃色三角警示，儀器會顯示污染物的種類，夠智能吧，這就是DS-1有的SmartQC功能
RNA濃度質(zhì)控的標(biāo)準(zhǔn)方法是熒光法，除非是純度很高的RNA也可以采用紫外法。熒光法采用RNA特異性染料，可以準(zhǔn)確的測量RNA濃度。DS-11FX不但提供RNA濃度質(zhì)控，也可以提供DNA和蛋白的濃度精確控制，功能超級強(qiáng)大哦。