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廣州研究團(tuán)隊(duì)成功利用TALEN技術(shù)在小型豬中敲除了RAG基因
閱讀：866 發(fā)布時(shí)間：2016-10-19據(jù)上海恒遠(yuǎn)生物報(bào)道：中國(guó)科學(xué)院廣州生物醫(yī)藥與健康研究院賴良學(xué)博士的研究團(tuán)隊(duì)成功利用TALEN技術(shù)在小型豬中敲除了RAG基因(Recombination activating GENE，重組激活基因)，獲得了重癥聯(lián)合免疫缺陷小型豬模型，該研究成果于6月27日在線發(fā)表在免疫學(xué)專業(yè)雜志Journal of immunology上。
團(tuán)隊(duì)主要成員楊化強(qiáng)博士、黃姣博士等分別針對(duì)豬的RAG1和RAG2的外顯子設(shè)計(jì)了TALEN質(zhì)粒對(duì)，對(duì)豬的胎兒成纖維細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染后獲得雜合和純合的RAG1/2敲除的細(xì)胞克隆。細(xì)胞克隆用于體細(xì)胞核移植后獲得27頭克隆豬，其中有10頭為RAG2單等位堿基缺失，9頭為RAG1雙等位堿基缺失，3頭為RAG2雙等位堿基缺失，這些堿基缺失都導(dǎo)致了外顯子讀碼框移碼。RAG1/2雙等位敲除豬表現(xiàn)出了典型的重癥聯(lián)合免疫缺陷疾病(Severe combined immunodeficiency disease, SCID)特征，包括胸腺weisuo，脾臟發(fā)育不良，淋巴細(xì)胞減少，體細(xì)胞基因組V(D)J重排消失，無成熟的T、B細(xì)胞。
免疫缺陷性動(dòng)物是指先天遺傳突變或用人工方法造成一種或多種免疫系統(tǒng)組成成分缺陷的動(dòng)物，重癥聯(lián)合免疫缺陷疾病,即SCID小鼠被廣泛運(yùn)用于感染免疫、炎癥、腫瘤和干細(xì)胞等相關(guān)研究。但小鼠在體型、壽命和對(duì)炎癥的免疫反應(yīng)機(jī)制等與人類相差較大，在疫苗的開發(fā)、藥物篩選與臨床評(píng)價(jià)、干細(xì)胞治療的長(zhǎng)期跟蹤等與人類臨床相關(guān)的研究中受到局限。由于豬在體型、壽命、生理指標(biāo)，特別是免疫機(jī)制等與人類相近，該研究成功建立的RAG敲除的SCID小型豬模型有望在生物醫(yī)藥和轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)中發(fā)揮重要作用。
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