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東南大學劉老師咨詢細胞裂解液檢測IL-24指標樣本收集問題
閱讀：801 發(fā)布時間：2015-12-162015年三月份東南大學張同學在我司代測了人IL-24 ELISA試劑盒，現張同學的實驗課題已圓滿結束。同實驗室學生劉同學受張同學介紹昨日我司銷售部吳，準備近期同樣做人IL-24 ELISA試劑盒的課題檢測。準備收集人的細胞裂解液樣本做檢測。關于樣本的收集方法希望得到我司的。溝通結束后，我司技術部以WORD文檔形式詳細整理了細胞裂解液的收集方法答復劉老師。劉老師也表示，樣本預計半個月左右收集完成，收集完成后將樣本交由我司進行代測。期間任何技術問題我司*時間提供。
細胞裂解液收集方法：
1）.吸去培養(yǎng)板內的培養(yǎng)基，用胰酶消化細胞，加適量培養(yǎng)基將細胞從培養(yǎng)板上吹下來。懸浮細胞可省略。
2）.收集細胞懸液，1000×g離心10min，棄去培養(yǎng)基，用預冷的PBS潤洗3次。
3） .加入適量的預冷PBS或細胞裂解液（臨用前加入蛋白酶抑制劑）重懸細胞。通常6孔板一個孔的細胞量需要150~250μL PBS重懸。
4）.將樣品放入-20℃或-80℃，使樣品冷凍，再放室溫解凍樣品，反復凍融幾次，使細胞充分裂解。也可將樣品進行超聲破碎，以達到裂解的目的。
5）.4℃ 10000×g 離心10min，除去細胞碎片，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反復凍融。