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伏馬毒素ELISA試劑盒說明書
閱讀：1068 發(fā)布時間：2013-7-12本試劑盒僅供研究使用。
伏馬毒素ELISA試劑盒使用目的：
本試劑盒用于飼料、魚、蝦和肉類組織（如雞、牛肉和豬肉），雞蛋、蜂蜜、牛奶、血
清和尿樣中伏馬毒素（FB1）殘留的定量檢測。
伏馬毒素ELISA試劑盒實驗原理
本試劑盒采用競爭ELISA 方法，在微孔板包被有伏馬毒素（FB1）偶聯(lián)抗原，加入伏
馬毒素（FB1）標準品或樣品，游離伏馬毒素（FB1）與微孔條上預包被的伏馬毒素（FB1）
偶聯(lián)抗原互相競爭抗伏馬毒素（FB1）抗體酶標記物，用TMB 底物顯色，加入終止液后顏
色由藍色變?yōu)辄S色，用酶標儀在450nm 波長下進行檢測，吸光值與樣品中伏馬毒素（FB1）
含量成反比，通過標準曲線計算樣品中伏馬毒素（FB1）的含量。
伏馬毒素ELISA試劑盒組成
預包被的伏馬毒素（FB1）偶聯(lián)抗原的可拆酶標板：1 塊（12 孔×8 條）。
伏馬毒素（FB1）標準品：6 瓶（1ml/瓶），含量分別是： 0 ppb，0.1 ppb,0.3 ppb,0.9 ppb,2.7
ppb,8.1 ppb。
抗伏馬毒素（FB1）抗體酶結合物：1 瓶（6ml）。
顯色液A：1 瓶（6ml）。
顯色液B：1 瓶（6ml）。
終止液：1 瓶（6ml），2M 硫酸。
樣本稀釋液：1 瓶（10×, 6ml），用于樣品稀釋用。
濃縮洗滌液：1 瓶（20×，20ml），用于洗板。
說明書一份。
伏馬毒素ELISA試劑盒貯存：
1.試劑盒貯存于2~8℃，切勿冷凍
2.未用完的微孔板應該密封干燥保存
伏馬毒素ELISA試劑盒注意事項
1.使用試劑盒前請仔細閱讀說明書。
2.不要使用過期試劑盒。
3.試劑盒使用前，將試劑恢復至室溫（25±2℃），建議至少回溫2小時。
4.標準品中含有伏馬毒素（FB1），使用時應特別注意，操作時應帶手套。
5.終止液中含有硫酸，使用時防止灼傷皮膚及腐蝕衣物。
6.不同標準品、樣品所用吸頭不能混用，否則會影響試驗結果。
7.不同批號試劑盒中的試劑不得混用；不同標準品、樣品所用吸頭不得混用，否則會影響
實驗結果。
8.稀釋樣本時必須用本試劑盒中的樣本稀釋液，否則會影響實驗結果
9.混合試劑時應避免起泡。
伏馬毒素ELISA試劑盒工作液準備
伏馬毒素（FB1）標準品溶液：0ppb,0.1ppb,0.3 ppb,0.9ppb,2.7 ppb,8.1ppb
濃縮洗滌液：用蒸餾水按1:20（1+19）稀釋備用
樣本稀釋液：備用
顯色劑：已備用，避免光線直照
反應終止液：已備用
伏馬毒素ELISA試劑盒樣品處理：
取10g粉碎的樣品，加 20ml 70%甲醇溶液
強力振蕩3分鐘
用Whatman 濾紙過濾
取25μl處理后的樣品，加入25μl樣本稀釋液于反應孔中（樣本稀釋倍數(shù)為2）
伏馬毒素ELISA試劑盒結果計算
定量分析：
所獲得的每個濃度標準溶液和樣本吸光度值的平均值（B）除以*個標準（0標準）
的吸光度值（B0）再乘以100%，即百分吸光度值。
B— 標準溶液或樣本溶液的平均吸光度值
B0— 0μg/L標準溶液的平均吸光度值
以伏馬毒素（FB1）濃度的對數(shù)值為X軸，百分吸光度值為Y軸，繪制標準曲線圖。根
據(jù)樣品百分吸光度值，可從曲線上得到對應點的橫坐標，即為伏馬毒素（FB1）濃度的對數(shù)
值，求得反對數(shù)即為測定液中伏馬毒素（FB1）濃度C（ppb）
由于樣品經(jīng)過了預先稀釋，因此根據(jù)標準曲線所得出的樣品濃度一定要再乘以其稀釋
倍數(shù)。
半定量測定：
目測半定量測定：首先選擇一個適當?shù)臉藴室号c樣品同運行，根據(jù)樣品與標準品吸光
度值的高低比較，判斷樣品濃度值是小于還是大于標準值。
儀器半定量測定：首先選擇一個適當?shù)臉藴室号c樣品同運行，根據(jù)樣品與標準品顏色
深淺比較，判斷樣品濃度值是小于還是大于標準值。