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技術文章

ELISA實驗做復孔有必要嗎

閱讀:13261          發(fā)布時間:2016-3-14

本周一上午,中南大學劉老師送樣我司代測人IL-24的ELISA實驗。劉老師所送樣本量較少(18個樣本),訂購了我司試劑盒的zui小規(guī)格就是48T(48T可以檢測37個樣本,11孔做標準空白對照孔),收到劉老師樣本后我司銷售專員建議老師實驗可以做個復孔,這樣的實驗報告結果會更加。

劉老師聽取了我司銷售專員的建議,在設計ELISA復孔檢查時,提出問題:是對同一個樣品作兩次稀釋,再分別加到板上的兩個孔,還是只稀釋一次,然后吸取兩次分別加到兩個孔?

我司技術答復:

在實驗室階段,可能需要多次稀釋,然后將不同稀釋次數(shù)的分別做復孔,以便檢查稀釋過程中帶來的誤差;如果同一次稀釋的復孔一致的存在檢測差異大,可能ELISA板的均一性存在一定問題(排除操作因素)。如果不同稀釋次數(shù)差異大,說明稀釋方法有問題。在ELISA實驗中設復孔,目的是為了減少本次實驗的系統(tǒng)誤差對實驗數(shù)據(jù)帶來的影響,有條件的話復孔的數(shù)量可以增加,系統(tǒng)誤差更小。

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