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技術(shù)文章

微生物直接計(jì)數(shù)法

閱讀:1306          發(fā)布時(shí)間:2013-12-12

利用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板進(jìn)行直接計(jì)數(shù)。
 計(jì)數(shù)前需對(duì)樣品做適當(dāng)稀釋,然后將經(jīng)過(guò)適當(dāng)稀釋的菌懸液(或孢子懸液)放在血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室內(nèi),按照在顯微鏡下觀察到的微生物數(shù)目代入計(jì)算公式運(yùn)算后,即可得出單位體積微生物總數(shù)目。
 此法的優(yōu)點(diǎn)是直觀、快速。
 用于直接測(cè)數(shù)的菌懸液濃度一般不宜過(guò)低或過(guò)高(常大于106個(gè)/mL)?;钴S運(yùn)動(dòng)的細(xì)菌應(yīng)現(xiàn)用甲醛殺死或適度加熱以停止其運(yùn)動(dòng)。
 顯微計(jì)數(shù)法適用于各種含單細(xì)胞菌體的純培養(yǎng)懸浮液,如有雜菌或雜質(zhì),常不易分辨。
 菌體較大的酵母菌或霉菌孢子可采用血球計(jì)數(shù)板,一般細(xì)菌則采用彼得羅夫·霍澤(Petrof Hausser)細(xì)菌計(jì)數(shù)板。
 兩種計(jì)數(shù)板的原理和部件相同,只是細(xì)菌計(jì)數(shù)板較薄,可以使用油鏡觀察。而血球計(jì)數(shù)板較厚,不能使用油鏡,計(jì)數(shù)板下部的細(xì)菌不易看清。
 每個(gè)方格網(wǎng)共分九個(gè)大方格,中間的方格即為計(jì)數(shù)區(qū)。
 計(jì)數(shù)區(qū)分為16個(gè)中方格,而每個(gè)中方格又分成25個(gè)小方格,即計(jì)數(shù)區(qū)都由400個(gè)小方格組成。
 每毫升菌懸液中含有細(xì)胞數(shù)=每個(gè)小格中細(xì)胞平均數(shù)(N)3 系數(shù)(Κ )3 菌液稀釋倍數(shù)(d)。

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