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技術(shù)文章

化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)

閱讀:1669          發(fā)布時(shí)間:2013-8-6

化學(xué)發(fā)光免疫分析法以標(biāo)記方法的不同而分為兩種:
(1)化學(xué)發(fā)光標(biāo)記免疫分析法;
(2)酶標(biāo)記、以化學(xué)發(fā)光底物作信號試劑的化學(xué)發(fā)光酶免疫分析法
化學(xué)發(fā)光標(biāo)記免疫分析
化學(xué)發(fā)光標(biāo)記免疫分析又稱化學(xué)發(fā)光免疫分析(CL IA ) , 是用化學(xué)發(fā)光劑直接標(biāo)記抗原或抗體的免疫分析方法。常用于標(biāo)記的化學(xué)發(fā)光物質(zhì)有吖啶酯類化合物——acridin ium ester (A E) , 是有效的發(fā)光標(biāo)記物[ 3 ] , 其通過起動(dòng)發(fā)光試劑(N aOH2H2O 2 ) 作用而發(fā)光, 強(qiáng)烈的直接發(fā)光在一秒鐘內(nèi)完成, 為快速的閃爍發(fā)光。吖啶酯作為標(biāo)記物用于免疫分析, 其化學(xué)反應(yīng)簡單、快速、無須催化劑; 檢測小分子抗原采用競爭法, 大分子抗原則采用夾心法 , 非特異性結(jié)合少, 本底低; 與大分子的結(jié)合不會減小所產(chǎn)生的光量, 從而增加靈敏度。
化學(xué)發(fā)光酶免疫分析
從標(biāo)記免疫分析角度, 化學(xué)發(fā)光酶免疫分析( chem ilum inescen t enzym e imm unoassay,CL E IA ) , 應(yīng)屬酶免疫分析, 只是酶反應(yīng)的底物是發(fā)光劑, 操作步驟與酶免分析*相同[ 5 ]: 以酶標(biāo)記生物活性物質(zhì)(如酶標(biāo)記的抗原或抗體) 進(jìn)行免疫反應(yīng), 免疫反應(yīng)復(fù)合物上的酶再作用于發(fā)光底物, 在信號試劑作用下發(fā)光, 用發(fā)光信號測定儀進(jìn)行發(fā)光測定。目前常用的標(biāo)記酶為辣根過氧化物酶(HRP) 和堿性磷酸酶(AL P) , 它們有各自的發(fā)光底物。

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