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目前酶聯(lián)免疫法檢測用試劑盒種類繁多，有國外進(jìn)口的，有國內(nèi)自行研制生產(chǎn)的，如何在眾多的品牌中選擇既能滿足檢測要求又價(jià)格低廉的試劑盒是一個問題。本人根據(jù)使用這些試劑盒，在實(shí)際檢測中發(fā)現(xiàn)，一般在試劑盒說明書中列出以下指標(biāo)：zui低檢測限；回收率；交叉反應(yīng)率；標(biāo)準(zhǔn)曲線圖譜及數(shù)據(jù)，標(biāo)準(zhǔn)曲線至少由5個濃度組成；IC50測定值及變形曲線點(diǎn)數(shù)目的是比較規(guī)范的試劑盒，可以選擇。以下就針對酶聯(lián)免疫試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證的幾個方法解析，歡迎閱讀分享。

在使用酶聯(lián)免疫法檢測樣品時，應(yīng)對方法進(jìn)行驗(yàn)證。主要測定以下內(nèi)容：
1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的測定，標(biāo)準(zhǔn)曲線至少由5個濃度組成，測定次數(shù)不少于5次，以確定工作濃度范圍和IC50范圍。一般臨界值為IC50附近，檢測靈敏度高。
2 樣品檢測限的測定。
3 樣品添加回收實(shí)驗(yàn)。對禁用藥物可添加定量限和2倍定量限，對于有zui高殘留*(MRL)的藥物，可添加MRL和MRL上下各一個濃度。
準(zhǔn)確度：若回收率大于40％符合相應(yīng)檢測標(biāo)準(zhǔn)的要求。精密度：批內(nèi)變異系數(shù)每批平行樣之間的變異系數(shù)小于或等于25％，對于禁用藥物小于或等于30％。批間變異系數(shù)所有樣品間變異系數(shù)小于或等于30％，對于禁用藥物小于或等于40％。
滿足以上準(zhǔn)確度和精密度要求，說明酶聯(lián)免疫方法可行，可用來檢測藥物殘留。
4 對于可用于多殘留檢測的試劑盒，以交叉反應(yīng)率低的藥物做陽性添加測定臨界值(cut-off)。
5 實(shí)際檢測樣品時要包括以下實(shí)驗(yàn)：至少做兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線，兩個陰性對照品，兩個添加臨界值(cut-off)的陽性對照品，兩個平行的待檢樣品。檢測結(jié)果出來后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線形狀(符合檢測要求為S形)，IC50與臨界值是否相近及陽性樣品回收率，樣品平行情況可確定檢測是否可信。

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