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試劑盒供應(yīng)商為您提供ELISA檢測小技巧
閱讀：314 發(fā)布時間：2014-12-11| 提 供 商 | 上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司 | 資料大小 | 55.5KB |
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試劑盒供應(yīng)商提供ELISA操作方法技巧：
1. 試劑準(zhǔn)備
① 稀釋緩沖液：用950ml蒸餾水稀釋50ml的濃縮緩沖液。
② 將腦鈉肽標(biāo)準(zhǔn)液用1ml稀釋緩沖液溶解，BNP濃度則為1000μg/l。用稀釋緩沖液稀釋成下列濃度：0.01、0.1、1、10、100μg/l。
③ 分別用5ml稀釋緩沖液溶解一抗、生物素標(biāo)記人BNP肽段，搖勻。
④ 取鏈親和素-辣根過氧化物酶結(jié)合物（SA-HRP）12μl加入到12ml稀釋緩沖液中，搖勻（用前稀釋）。
2. 操作
在96孔微量反應(yīng)板上，設(shè)A1為空白對照，B1為總結(jié)合孔，C1到G1加系列標(biāo)準(zhǔn)品，其余孔加待測定血清樣品。
ELISA試劑盒的組成：
① 終止液（2 mol/L 鹽酸15ml）
② 20×濃縮緩沖液（50ml）
③ 包被有二抗的微量反應(yīng)板（96孔）
④ 封板膠（3張）
⑤ 一抗（兔抗人BNP IgG）
⑥ BNP標(biāo)準(zhǔn)液（1μg）
⑦ 生物素標(biāo)記人BNP段
⑧ 鏈親和素-辣根過氧化物酶結(jié)合物（SA-HRP 30μl）
⑨ 底物液（TMB 12ml）
試劑盒供應(yīng)商提供ELISA計算技巧：
在半對數(shù)坐標(biāo)紙上，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度的對數(shù)值為橫坐標(biāo)，各標(biāo)準(zhǔn)品相應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo)，繪制半對數(shù)坐標(biāo)校正曲線。由校正曲線求得樣品的濃度（μg/l）。