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公司動(dòng)態(tài)
DNA損傷修復(fù)研究取得進(jìn)展
閱讀：831 發(fā)布時(shí)間：2017-3-7日前，中國(guó)科學(xué)院生態(tài)環(huán)境研究中心環(huán)境化學(xué)與生態(tài)毒理學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室汪海林研究組在DNA損傷修復(fù)方面取得重要進(jìn)展，相關(guān)研究成果近日在線(xiàn)發(fā)表于《細(xì)胞發(fā)現(xiàn)》雜志。
具有活性的RecA/Rad51核蛋白絲的結(jié)構(gòu)及其介導(dǎo)的鏈交換過(guò)程，一直以來(lái)是DNA修復(fù)研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)。 汪海林研究組設(shè)想，在生理?xiàng)l件下，由于A(yíng)TP的不斷水解，相應(yīng)地，RecA可解離，離去的RecA留下空位，引起新的RecA結(jié)合和組裝，因此，將形成一種動(dòng)態(tài)的RecA核蛋白絲。但是，當(dāng)前的單分子分析等*技術(shù)也難以測(cè)量RecA核蛋白絲的結(jié)合計(jì)量學(xué)，因此難以分析這種動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu)。
該研究組在前期研究工作的基礎(chǔ)上，利用研制的毛細(xì)管電泳-激光誘導(dǎo)熒光偏振裝置，并進(jìn)一步發(fā)展了研究RecA在單鏈DNA（ssDNA）上動(dòng)態(tài)組裝的分析新方法。利用這種新分析方法，他們發(fā)現(xiàn)，在生理?xiàng)l件下（即存在有效的ATP水解），RecA在ssDNA上組裝可形成三種類(lèi)型的核蛋白絲，包括高、中、低密度的核蛋白絲，但主要形成低密度、不飽和的核蛋白絲組裝體，其中超過(guò)一半的DNA并未結(jié)合RecA蛋白，即裸露的。在線(xiàn)熒光偏振分析、電鏡成像分析、酶切保護(hù)性分析等一致證明了這一結(jié)果。
該研究組通過(guò)一系列體外和活體實(shí)驗(yàn)，證明了介導(dǎo)同源重組修復(fù)的核蛋白絲的基本結(jié)構(gòu)是由RecA蛋白通過(guò)ATP水解有限組裝到單鏈DNA上形成的不飽和核蛋白絲組裝體。這一發(fā)現(xiàn)是對(duì)傳統(tǒng)同源重組修復(fù)的關(guān)鍵核蛋白絲組裝體基礎(chǔ)結(jié)構(gòu)認(rèn)識(shí)的一個(gè)重要改變，為深入理解同源重組修復(fù)機(jī)制提供理論依據(jù)。
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