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上海恒遠(yuǎn)教你如何測(cè)定干擾素含量
閱讀：2072 發(fā)布時(shí)間：2017-5-5干擾素能刺激某些指示細(xì)胞(如人羊膜上皮細(xì)胞Wish株、人喉癌細(xì)胞株Hep-2、人胚肌皮、肺單層細(xì)胞等)產(chǎn)生抗病毒蛋白，從而使細(xì)胞免受水皰性口炎病毒(VSV)的攻擊，根據(jù)待測(cè)樣品不同稀釋度的保護(hù)能力，計(jì)算出干擾素生物學(xué)活性單位。
【材料】 VSV、Wish細(xì)胞、MTT、二甲亞砜(DMSO)、10％FCS RPMI1640、培養(yǎng)板、培養(yǎng)瓶、CO2孵箱、超凈臺(tái)、酶標(biāo)檢測(cè)儀。
【結(jié)果】
以保護(hù)半數(shù)(50％)細(xì)胞免受病毒損害的zui高干擾素稀釋度為1個(gè)干擾素活性單位。也可從標(biāo)準(zhǔn)曲線中求得待測(cè)樣品的IFN活性單位。
【注意事項(xiàng)】
1、實(shí)驗(yàn)時(shí)先加IFN，后加指示細(xì)胞，以使細(xì)胞均勻分布于培養(yǎng)板底部。
2、本法對(duì)天然培養(yǎng)上清或重組IFN-α、IFN-β和IFN-γ均可檢測(cè)其活性單位。