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共焦掃描光學(xué)顯微鏡是什么

閱讀:1143      發(fā)布時間:2011-10-3
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共焦掃描光學(xué)顯微鏡是什么
    J. Z. Young, M. Minky等人早在50年代首先提出了共焦掃描光學(xué)顯微鏡的思想.隨后70年代P. Davidovitst'1,^.F. SlombaE')等人進一步研究共焦掃描光學(xué)顯微鏡的原理,使其在實際中得以應(yīng)用.80年代,越來越多的人從事這方面的研究,使之成為研究半導(dǎo)體材料和生物樣品的重要工具.
    共焦掃描光學(xué)顯微鏡的主要思想是共焦,所謂共焦就是指物鏡和目鏡的焦點重合于一點,物鏡和目鏡的焦平面重合于樣品被探測平面.把光聚焦于一點照射在樣品上,同時用“點”探測器來探測樣品的反射光,并進行信息處理而給樣品上這一點成像.‘激光照射的焦點在樣品上掃描,“點”探測器進行同步記錄,這樣可以得到整個樣品的成像.
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奧林巴斯顯微鏡
    當(dāng)樣品表面某點正好處于物鏡焦點時,探測器測得zui大反射光強;反之,則測得較小反射光強.從而給出樣品縱向結(jié)構(gòu)信息.
    這種顯微鏡一個突出的特點是排除了非焦點的結(jié)構(gòu)對成像的影響.在一般光學(xué)顯微鏡下成像,焦點_h和焦點外信息都被探測器接收,然后數(shù)字化輸人計算機完成顯微鏡成像,因而需要大量的計算來排除焦點外信息對焦點上成像的影響.當(dāng)明亮的焦點外區(qū)域與陰暗的焦點上區(qū)域重疊時,會產(chǎn)生非常嚴(yán)重的測量誤差問題,而且要確切地知道物鏡的光轉(zhuǎn)換函數(shù)也是難于做到的二用共焦掃描光學(xué)顯微鏡可以很好地解決這些問題.可以看出:首先,樣品處于顯微鏡的焦平面上,所以激光照射在樣品非焦點上的光強很弱;其次,在探測器前放置一個特殊的光闌,而光闌孔正好處于聚光透鏡的焦點上,這樣來自于樣品上非焦點處的t被光闌擋住,從而可以得到高質(zhì)量的成像。
    利用這種技術(shù)對生物樣品的研究取得了良好的效果.從以下一些實驗結(jié)果可以明顯地比較出共焦掃描光學(xué)顯微鏡*于一般顯微鏡.
    搖蚊多線染色體在原位的熒光成像.可以看出:共焦成像給出了更多的信息,明暗對比度高,成像更加清晰。
    在對一系列生物樣品進行實驗后,我們可以得出下面的結(jié)論:共焦技術(shù)確實比常規(guī)顯微鏡成像效果有很大改進.它對較厚樣品成像效果上的改進更為顯著。
    該項技術(shù)空間分辨率為0.5pm。由于它排除了焦平面外信息的干擾,可以進行逐層層析,所以該項技術(shù)還能在三維方向成像,從而顯示出樣品的三維結(jié)構(gòu).它在生物醫(yī)學(xué)及半導(dǎo)體工業(yè)方面受到普遍歡迎.
    這一顯微技術(shù)在實際中應(yīng)用也還存在一些困難.例如,實現(xiàn)照明系統(tǒng)與探測系統(tǒng)的同步移動是困難的;再如,分辨率直接與光闌孔徑大小相,要提高分辨率就要縮小孔徑,這就使分辨率的提高受到限制,所以這一技術(shù)有待進一步發(fā)展。
 

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