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CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)與ATCC培養(yǎng)

2013-10-12　閱讀(768)

ATCC產(chǎn)品培養(yǎng)說(shuō)明生長(zhǎng)液：1L培養(yǎng)液+10%胎牛血清+1.5gNaHCO3 +100u/L雙抗凍存液：生長(zhǎng)液+5%二甲基亞砜一．HB-46 、HB-47、HB-112、 HB-114單抗細(xì)胞株到手后處理 1．在37°C水浴中迅速融化，保持蓋子在水面上以防止污染，解凍過(guò)程要快（2 min）。 2. 70%酒精消毒去除污染，操作過(guò)程注意無(wú)菌操作。 3．將內(nèi)容物轉(zhuǎn)至含9ml*生長(zhǎng)液的離心管，大約125xg 5-7分鐘。 4．用生長(zhǎng)液再懸浮細(xì)胞沉淀物，并將其轉(zhuǎn)到25 cm2或75 cm2 小方瓶（裝入培養(yǎng)液放入溫箱預(yù)熱15 min以調(diào)節(jié)PH值7.0-7.6） 5．37°C下 5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng) 二．收到的液體培養(yǎng)以確認(rèn)是否污染： 1．肉眼觀察是否有微生物污染。 2．在37°C溫育數(shù)小時(shí)后，將瓶?jī)?nèi)容物在125 xg離心5- 10 min。收集原來(lái)的運(yùn)輸?shù)呐囵B(yǎng)液以備后用。加入10ml培養(yǎng)液。 3．重懸細(xì)胞在濃度約2-3*105每高倍鏡下 4．37°C下 5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng) 一．HB-48、HB-49單抗細(xì)胞株到手后處理 1．在37°C水浴中迅速融化，保持蓋子在水面上以防止污染，解凍過(guò)程要快（2 min）。 2. 70%酒精消毒去除污染，操作過(guò)程注意無(wú)菌操作。 3．將內(nèi)容物轉(zhuǎn)至含9ml*生長(zhǎng)液的離心管，大約125xg 5-10分鐘。 4．用生長(zhǎng)液再懸浮細(xì)胞沉淀物，并將其轉(zhuǎn)到到25 cm2或75 cm2小方瓶（裝入培養(yǎng)液放入溫箱預(yù)熱15 min以調(diào)節(jié)PH值7.0-7.6） 5．37°C下 5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng) 二．收到的液體培養(yǎng)以確認(rèn)是否污染： 1．肉眼觀察是否有微生物污染。 2．在37°C溫育數(shù)小時(shí)后，將瓶?jī)?nèi)容物在125 xg離心5- 10 min。收集原來(lái)的運(yùn)輸?shù)呐囵B(yǎng)液以備后用。加入10ml培養(yǎng)液。 3．重懸細(xì)胞在濃度約2-3*105每高倍鏡下 4．37°C下 5% CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)

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