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腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)成纖維細(xì)胞

2012-2-3 閱讀(1728)

腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)成纖維細(xì)胞 

    依據(jù)腫瘤細(xì)胞比成纖維細(xì)胞貼壁速度慢的*的地方,并接合運用不加血清的營養(yǎng)液,把包括兩類細(xì)胞的細(xì)胞懸液反反復(fù)復(fù)貼壁,使兩類細(xì)胞互相離合,操作辦法與傳代相同。

  1 待細(xì)胞成長達(dá)一定數(shù)目后,倒出舊培育液,用胰酶克化后,Hanks 沖洗2次,參加不含血清的培育液,吹打制成細(xì)胞懸液;

  2 取編號為此A、B、C三個培育瓶;首先把懸液接種入A培育瓶中。置恒溫培養(yǎng)箱中靜止培育520分鐘后,輕輕傾側(cè)培育瓶,讓液體集中瓶角后慢慢吸出所有培育液,再接種入B培育瓶中后;向A瓶中補給少量培育液置培養(yǎng)箱中接著培育;

  3 培育B瓶中細(xì)胞520分鐘后,接處置A的辦法,把培育液灌注C培育瓶中;再向B瓶中補加營養(yǎng)物質(zhì)放培養(yǎng)箱KLYQ中。

        當(dāng)三個瓶內(nèi)都包括培育液后,均在生化培養(yǎng)箱中接著培育。如操作成功,第二天仔細(xì)查看可見A瓶主要為成纖維細(xì)胞,B瓶兩類細(xì)胞相雜,C瓶有可能主要為癌細(xì)胞。*時可反反復(fù)復(fù)處置多次,直到癌細(xì)胞醇化截止。  



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