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免疫學(xué)技術(shù)在檢驗和檢疫中應(yīng)用的原理

2011-8-3  閱讀(710)


借助抗原和抗體在體外特異結(jié)合后出現(xiàn)的各種現(xiàn)象,可以對樣品中的抗原或抗體進行定性、定量、定位的檢測。

抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)并不是化學(xué)反應(yīng),而是非共價的可逆結(jié)合??乖瓫Q定簇和抗體分子可變區(qū)所形成的互補構(gòu)型,造成兩種分子間具有較強的親和力??臻g構(gòu)型互補程度不同,抗原分子和抗體分子之間結(jié)合力強弱也不同?;パa程度高,則親和力強。此外,反應(yīng)溫度、酸堿度和離子濃度對抗原和抗體分子上各基因的解離性和電荷特性也有重要的影響,抗體與抗原決定簇之間的結(jié)合力大小可用親和力來表示。高親和力的抗體與抗原的結(jié)合力強,即使抗原濃度很低時也有較多的抗體結(jié)合抗原形成免疫復(fù)合物。

根據(jù)抗原—抗體結(jié)合形成免疫復(fù)合物的性狀與活性特點,可以對標(biāo)本中的抗原或抗體進行定性、定位或定量的檢測。定性和定位檢測比較簡單,即用已知的抗體和待檢樣品混合,經(jīng)過一段時間,若有免疫復(fù)合物形成的現(xiàn)象發(fā)生,就說明待檢樣品中有相應(yīng)的抗原存在。若無預(yù)期的現(xiàn)象發(fā)生,則說明樣品中無相應(yīng)的抗原存在。同理也可用已知的抗原檢測樣品中是否有相應(yīng)抗體。對抗原或抗體進行定量檢測時,反應(yīng)中加入抗原和抗體的濃度與形成免疫復(fù)物的濃度呈函數(shù)關(guān)系。

可根據(jù)免疫復(fù)合物產(chǎn)生的多少來推算樣品中抗原(或抗體)的含量。在一定的反應(yīng)條件下,加入一定濃度的已知抗體(或抗原),反應(yīng)產(chǎn)生的免疫復(fù)合物多少與待檢樣品中含有相應(yīng)抗原(或抗體)量成正比??捎脴?biāo)準曲線推算出樣品中抗原(或抗體)的含量。如免疫單向擴散試驗、免疫比濁試驗和酶聯(lián)免疫檢測等都屬于這類方法。

 



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