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逆轉錄PCR

時間:2013-7-29閱讀:1900
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 逆轉錄PCR,或者稱反轉錄PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR),是聚合酶鏈式反應(PCR)的一種廣泛應用的變形。在RT-PCR中,一條RNA鏈被逆轉錄成為互補DNA,再以此為模板通過PCR進行DNA擴增。由一條RNA單鏈轉錄為互補DNA(cDNA)稱作“逆轉錄”,由依賴RNA的DNA聚合酶(逆轉錄酶)來完成。隨后,DNA的另一條鏈通過脫氧核苷酸引物和依賴DNA的DNA聚合酶完成,隨每個循環(huán)倍增,即通常的PCR。原先的RNA模板被RNA酶 H降解,留下互補DNA。
  RT-PCR的指數(shù)擴增是一種很靈敏的技術,可以檢測很低拷貝數(shù)的RNA。RT-PCR廣泛應用于遺傳病的診斷,并且可以用于定量監(jiān)測某種RNA的含量。(檢測基因表達的方法,參見Northern Blot法。)
  RT-PCR有時候也會指代實時PCR(real-time PCR)。為了與逆轉錄PCR相區(qū)別,通常被寫作“定量PCR”(quantitative PCR)或者RTQ-PCR(real-time quantitative PCR)。

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