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技術(shù)文章

胎牛血清的質(zhì)量要求

閱讀:1405          發(fā)布時(shí)間:2021-3-19
      隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展和生活水平的不斷提高對(duì)生物醫(yī)藥產(chǎn)品的質(zhì)量要求也越來越高,所以對(duì)制備工藝中所涉及到的各種原材料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求也越來越高,特別是對(duì)用于細(xì)胞培養(yǎng)基中的主要天然成份――胎牛血清的質(zhì)量要求也不斷提高。 
    
一、血清來源
   
可從世界各國(guó)收集胎牛血清,但是必須符合他的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和美國(guó)農(nóng)業(yè)部進(jìn)口要求。地方當(dāng)局還不清楚本地是否有牛海綿狀病毒流行的血清不收集,有說明血清質(zhì)量的證明資料:包括收集過程的全部資料、檢驗(yàn)結(jié)果和交付情況。
   
二、血清的收集
 
胎牛血清是心臟穿刺取血,新生牛(10~14天)和小牛(10個(gè)月內(nèi))血清靜脈取血。血清采集條件必須符合工業(yè)生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn):低溫下采集、一次分離、分離后立即混合凍存。符合要求的血清56℃水浴30分鐘滅活。
 
三、血清的制備
  
1.超低IgG胎牛血清:通過親和層析工藝去除胎牛血清中的γ球蛋白,使FBSγ球蛋白含量減到zdi,一般IgG≤5ug/ml,生物學(xué)活性不變。
  
2.血清透析:用12000~14000分子量的透析膜在0.15M NaCl中透析直到使葡萄糖含量<0.5mg/ml(用葡萄糖氧化酶/過氧化酶方法測(cè)定)。
  
3.γ-射線照射:已經(jīng)證明γ-射線照射可以有效滅活血清中可能污染的病毒、支原體。照射劑量為30~45KG。而且這個(gè)劑量的γ-射線照射不會(huì)改變血清的理化性質(zhì)和對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的影響。
  
4.除菌過濾:經(jīng)過上述處理的粗制血清再經(jīng)過一系列除菌濾膜過濾包括0.2微米(micron)和0.1微米濾膜。FBS要通過三層0.1微米濾膜,其他血清可通過0.2微米濾膜。

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