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中空纖維細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)

2013-11-8  閱讀(2103)

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為了讓細(xì)胞培養(yǎng)更簡單、更經(jīng)濟、更,美國FiberCell Systems公司十余年來一直致力于中空纖維細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)的開發(fā)。如今,這種與眾不同的培養(yǎng)系統(tǒng)已經(jīng)上市了。

      FiberCell中空纖維細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)模擬了生物體循環(huán)系統(tǒng)中毛纖維的結(jié)構(gòu)及功能,將天然親水聚合物,拉成兩端有開口的纖維。將此種中空纖維裝入柱狀的 塑膠容器中,其成品就像光纖排列在電纜中一樣。它利用中空纖維膜隔離細(xì)胞與細(xì)胞培養(yǎng)基,在中空纖維的外壁培養(yǎng)細(xì)胞。

 

空纖維是一種很小的、圓柱形的透濾材料,形狀類似于喝水用的吸管,并且直徑只有200 μm。這些纖維被裝入圓筒外殼中,這樣,經(jīng)圓筒末端泵入的細(xì)胞培養(yǎng)基就會流過纖維內(nèi)部。同時,細(xì)胞生長在纖維外側(cè)。于是,這些纖維就創(chuàng)造了一個半通透的屏 障,讓葡萄糖和乳酸這樣的小分子可以隨意地穿過纖維,而蛋白質(zhì)這樣的較大分子則不能穿過。如果有細(xì)胞因子或自分泌因子存在,則可以通過選擇纖維的孔徑或者 截留分子量(MWCO)來控制不同因素對細(xì)胞生長的影響。

中空纖維生物反應(yīng)器和其它細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的一個主要區(qū)別在于:中空纖維能形成易于細(xì)胞附著的多孔滲濾支撐,zui類似于活體內(nèi)的細(xì)胞生長方式。由于營養(yǎng)輸送是由下至上的,因此細(xì)胞很容易彼此堆積,形成一個具有多層細(xì)胞的層面。在中空纖維生物反應(yīng)器上,細(xì)胞傳代是不必要的。

中空纖維生物反應(yīng)器的另一個特點是培養(yǎng)的細(xì)胞濃度可以超過108/mL,而一般的旋轉(zhuǎn)燒 瓶培養(yǎng)的哺乳動物細(xì)胞濃度大約是106/mL。高濃度細(xì)胞可以產(chǎn)生高濃度分泌蛋白,并能快速開展病毒和寄生蟲感染,還可以減少細(xì)胞對血清的需求甚至使細(xì)胞 在無血清培養(yǎng)基中生長。因此,F(xiàn)iberCell中空纖維細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)是生產(chǎn)10 mg至1 g重組蛋白的。

這一新型培養(yǎng)系統(tǒng)適用于單克隆抗體生產(chǎn)、重組蛋白生產(chǎn)、內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)、淋巴細(xì)胞培養(yǎng)、體外毒理學(xué)研究和病毒載體生產(chǎn)。

FiberCell目前提供三種類型的纖維:聚砜、纖維素和PS+纖維。同時他們還提供三種不同的截留分子量:5 kd、20 kd和0.1微米。

親水性的聚砜纖維是特別為良好的細(xì)胞培養(yǎng)性能而設(shè)計的。5 kd MWCO和20 kd MWCO纖維的過濾率較纖維素纖維要高出10倍,便于快速的營養(yǎng)物和廢物交換。任何可粘附在塑料表面或懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞類型都能在聚砜纖維培養(yǎng)圓筒中很好地 生長。纖維素纖維一般不適用于細(xì)胞培養(yǎng),因為它們的低過濾率對細(xì)胞生長并非*,它們主要應(yīng)用在體外毒理學(xué)研究上。PS+纖維的性能*,它讓蛋白基質(zhì)、 抗體和細(xì)胞因子能與纖維表面結(jié)合。因此,這種纖維適合原代細(xì)胞類型,您可以控制與細(xì)胞相互作用的表面基質(zhì),而內(nèi)皮細(xì)胞可在纖維內(nèi)部生長。

這種操作簡便,耗材用量少,產(chǎn)量高,是大規(guī)模培養(yǎng)細(xì)胞的新選擇。

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