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kerafast VSV-ΔG-熒光素酶質(zhì)粒表達(dá)載體概述：
質(zhì)粒pVSV-ΔG-熒光素酶編碼復(fù)制子限制性重組水泡性口炎病毒(rVSV)的抗原鏈（或正鏈）RNA，其中糖蛋白(G)基因被螢火蟲(chóng)熒光素酶取代。該質(zhì)粒與編碼VSV核衣殼(N)、磷蛋白(P)、糖蛋白(G)和大聚合酶亞基(L)的質(zhì)粒一起使用，以回收VSV-G假型ΔG-熒光素酶病毒，如[1]所述。ΔG-熒光素酶的抗基因組RNA由噬菌體T7啟動(dòng)子在pBS中表達(dá)，該啟動(dòng)子已被進(jìn)一步修飾，以包含用于生成VSV抗基因組RNA 3'末端的丁型肝炎核酶和克隆在pBS-SK + 中SacII和SacI酶切位點(diǎn)之間的T7終止子序列[2,3]。
重組水泡性口炎病毒-ΔG(rVSV-ΔG)已被用于生產(chǎn)含有異源病毒包膜糖蛋白的VSV假型，包括需要高水平遏制的病毒。由于rVSV-ΔG的感染性僅限于單輪復(fù)制，因此僅可使用生物安全等級(jí)2(BSL-2)防護(hù)進(jìn)行病毒進(jìn)入分析。
產(chǎn)品：
目錄號(hào) | 產(chǎn)品 | 描述 |
EH1007 | pVSV-ΔG-熒光素酶質(zhì)粒表達(dá)載體 | 10 μL(1 μg/μL) |
EH1008 | VSV-ΔG-熒光素酶質(zhì)粒表達(dá)載體系統(tǒng) | 帶有一套輔助質(zhì)粒（VSV-N、VSV-P、VSV-L、VSV- G) |
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：
產(chǎn)品： | 質(zhì)粒 |
替代名稱： | 水泡性口炎病毒(VSV)ΔG-熒光素酶的抗原鏈（或正鏈）RNA |
基因/插入片段名稱： | ΔG-熒光素酶 |
襯墊尺寸： | 11,352 bp |
基因種類： | 水泡性口炎病毒 |
融合蛋白或標(biāo)簽： | 熒光素酶 |
載體骨架： | pBS-SK-ΦT |
載體大小(bp)： | 3105 bp |
克隆位點(diǎn)5’： | N/A（5'VSV序列直接連接到T7啟動(dòng)子） |
克隆位點(diǎn)3’： | 不適用（3'VSV序列直接連接到HDV核酶） |
細(xì)菌耐藥性： | 氨芐西林或卡那霉素（請(qǐng)參見(jiàn)藥瓶標(biāo)簽和裝箱單） |
高或低拷貝： | 高 |
37 ℃下在大腸桿菌中生長(zhǎng) | 是 |
備注 | 關(guān)于建議的方案，參見(jiàn)：Whitt,MA,J. Virol。Methods,2010. 169(2):p. 365-74. |
發(fā)貨日期： | 環(huán)境溫度（在濾紙上點(diǎn)樣）；冷包裝（液體） |
參考文獻(xiàn)：
- Whitt,M.A.,Generation of VSV pseudotypes using recombinant DeltaG-VSV for studies on virus entry,identification of entry inhibitors,and immune responses to vaccines.J. Virol.Methods,2010. 169(2):p. 365-74.
- Lawson,N.D.,et al.,Recombinant vesicular stomatitis viruses from DNA.程序未處理學(xué)術(shù)。Sci.（美國(guó)），1995. 92(10):p. 4477-4481。
- Stillman,E.A.,J.K. Rose,and M.A. Whitt,Replication and amplification of novel vesicular stomatitis virus minigenomes encoding viral structural proteins.J. Virol.,1995. 69:p. 2946-2953.
主要研究者負(fù)責(zé)申請(qǐng)機(jī)構(gòu)生物安全委員會(huì)對(duì)其實(shí)驗(yàn)室空間內(nèi)使用重組DNA、轉(zhuǎn)基因動(dòng)物或傳染性病原體的批準(zhǔn)，并在使用這些材料期間維持機(jī)構(gòu)生物安全委員會(huì)的批準(zhǔn)。
