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上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司
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procomcure PCCSKU1032說明書
VitaTaq®HS PCR試劑盒
僅供研究使用
Procomcure Biotech GmbHwww.procomcure。。ｃｏｍ office@procomcure.com
VitaTaq®HS DNA聚合酶是一種耐用可靠的Taq DNA聚合酶，適用于所有常見的PCR應(yīng)用，如菌落PCR、克隆應(yīng)用、高通量PCR和常規(guī)PCR。其抗體介導(dǎo)的HotStart功能允許在室溫下進(jìn)行反應(yīng)設(shè)置，并*控制反應(yīng)開始。
產(chǎn)品 | 尺寸 | 皮膚單位 |
| 200 U | PCCSKU1032 |
VitaTaq®HS PCR試劑盒 | 500 U | PCCSKU1033 |
| 2500 U | PCCSKU1034 |
儲存條件
將所有組分儲存在-20 ℃下，避免反復(fù)凍融循環(huán)。
所需的其他材料
無核酸酶dH2O
無核酸酶PCR管/板和密封選項(xiàng)熱循環(huán)儀
PCR引物（各10µM）dNTP混合物（各10 mM）模板DNA
反應(yīng)設(shè)置
- 將所有反應(yīng)組分*解凍并輕輕混合，以確保所有組分均勻分布。在無菌、無核酸酶試管中制備反應(yīng)液，加入聚合酶后輕輕混合。通過快速旋轉(zhuǎn)收集試管底部的所有液體。
組件 | 體積 | 終濃度 |
10X PCR緩沖液 | 5 µl | 1X |
dNTP混合物（各10 mM） | 0.5 µl | 各0.1 mM |
引物1(10µM) | 1 µl | 0.1 µM – 0.5 µM |
引物2(10µM) | 1 µl | 0.1 µM – 0.5 µM |
VitaTaq®HS DNA聚合酶(2 U/µL) | 0.5 µl | 1 U |
模板DNA | 1 µl | <1 µg |
dH2O | to 50 µl |
|
2) 根據(jù)這些指南進(jìn)行循環(huán)：
步驟 | 周期 | 溫度 | 持續(xù)時(shí)間 |
初始變性 | 1 | 94°C | 5 min |
|
30-35 | 94°C | 30秒 |
擴(kuò)增 | Tm-5 ℃ | 30秒 | |
| 72°C | 1 min/kb | |
終擴(kuò)展 | 1 | 72°C | 5 min |
保持 | 1 | 4°C |
|
3) 使用適當(dāng)百分比的丙烯酰胺或瓊脂糖凝膠通過凝膠電泳分析擴(kuò)增反應(yīng)。
