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haemtech蛋白質(zhì)S

2018-11-15  閱讀(791)

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haemtech蛋白質(zhì)S

蛋白質(zhì)S
的結(jié)構(gòu)域表示蛋白質(zhì)S的結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu),其中:GLA =含有γ-羧基谷氨酸殘基的區(qū)域,EGF =含有與人表皮生長因子同源的序列的區(qū)域,TSR =凝血酶敏感區(qū)域,?=未知功能區(qū)域,取代維生素K依賴性絲氨酸蛋白酶中發(fā)現(xiàn)的催化三聯(lián)體。

 

HCPS-0090

 

尺寸

100微克

公式

50%甘油/水(v / v)

 

存儲

-20℃下

純度

通過SDS-PAGE> 95%

 

活動決定

N / A

保質(zhì)期(妥善保存)

12個月

 

蛋白質(zhì)S是單鏈維生素K依賴性蛋白質(zhì),被認為在凝血和補體級聯(lián)中起作用(1,2)。在血漿中循環(huán)的蛋白質(zhì)S的大約60%與C4b結(jié)合蛋白(C4BP)復(fù)合。已經(jīng)表明,g-羧基谷氨酸(gla)依賴性蛋白S與帶負電荷的磷脂的結(jié)合可以起作用以在損傷后將C4BP濃縮在細胞表面。

在凝血系統(tǒng)中,蛋白質(zhì)S起抗凝血輔因子蛋白的作用。在Ca2 +和磷脂囊泡(Kd = 6×10-9M)(3)存在下,活化蛋白C(APC)與蛋白S形成1:1的化學(xué)計量復(fù)合物。在蛋白質(zhì)S的存在下,在血漿和未刺激的血小板表面觀察到因子Va的速率和APC的因子VIIIa失活的適度增加(3-10倍)。與C4BP結(jié)合的蛋白S不具有APC輔因子活性。近,已經(jīng)描述了增強蛋白S活性的另外的結(jié)合蛋白(4)。已經(jīng)提出凝血酶對蛋白S的蛋白水解失活作為該系統(tǒng)中的調(diào)節(jié)機制。通過凝血酶的單次切割通過去除含有g(shù)la結(jié)構(gòu)域的NH 2末端肽(Mr = 8000)來消除蛋白S輔因子活性。

蛋白質(zhì)S的結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)類似于其他維生素K依賴性凝血因子的結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu),除了蛋白質(zhì)S不具有催化三聯(lián)體。蛋白S是單鏈蛋白,在NH2末端結(jié)構(gòu)域中含有10個gla殘基,在4個表皮生長因子(EGF)結(jié)構(gòu)域中含有10個gla殘基。

如Jenny等所述,通過常規(guī)方法(9)和免疫親和層析的組合從新鮮冷凍血漿中分離人蛋白S. (5)。純化的蛋白質(zhì)S以50%(體積/體積)甘油/ H 2 O供應(yīng),應(yīng)儲存在-20℃。通過SDS-PAGE分析確定純度。

 

加載

人蛋白S,每泳道1μg

緩沖

MOPS

標準

SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa的)

 

本土化

等離子體,游離并與C4BP絡(luò)合

血漿濃度

10μg/ ml(免費)(6)

行動方式

Cofactor用于活化蛋白C.

分子量

69,000(7)

消光系數(shù)

Ë

1%

1厘米,280納米

 

= 9.5(7)

 

等電點

5.0-5.5(7)

結(jié)構(gòu)體

單鏈,NH2-末端gla結(jié)構(gòu)域,4個EGF結(jié)構(gòu)域

碳水化合物百分比

7%(7)

翻譯后修改

一個β-羥基天冬氨酸(8)十個gla殘基(7),三個β-羥基天冬酰胺(8)

 

 

參考:

  • 沃克,F(xiàn)J,Semin。血栓。Hemostas。,10,131(1984)。
  • Dahlback,B.,et al。,Semin。血栓。Hemostas。,10,139(1984)。
  • Walker,F(xiàn)J,J.Biol。Chem。,256,11128(1981)。
  • Walker,F(xiàn)J,J.Biol。Chem。,261,10941(1986)。
  • Jenny,RJ,et al。,Prep。Biochem。,16,227(1986)。
  • Dahlback,B.,Biochem。J.,209,837(1983)。
  • Discipio,RG等,Biochemistry,18,899(1979)。
  • Stenflo,J.,et al。,Proc。國家科。科學(xué)院。科學(xué)。美國,84,368(1987)。
  • Bajaj,SP,et al。,Prep。Biochem。,13,191(1983)

 

 

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