Haematologic Technologies，Inc。（HTI/haemtech）是一家ISO 9001：2015注冊公司，是一家專業(yè)從事體外研究用高質(zhì)量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點(diǎn)是凝血級聯(lián)中涉及的蛋白質(zhì)，以及骨代謝的調(diào)節(jié)。HTI產(chǎn)品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質(zhì)，包括酶原，酶，輔因子和抑制劑，以及單克隆和多克隆抗體的互補(bǔ)系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管，用于臨床研究。提供的服務(wù)包括定制蛋白質(zhì)純化，蛋白質(zhì)修飾，化驗(yàn)開發(fā)，合同制造和合同研究。

haemtech Haematologic Technologies，Inc。（HTI/haemtech）是一家ISO 9001：2015注冊公司，是一家專業(yè)從事體外研究用高質(zhì)量血漿蛋白分離和表征的主要制造商。HTI的重點(diǎn)是凝血級聯(lián)中涉及的蛋白質(zhì)，以及骨代謝的調(diào)節(jié)。HTI產(chǎn)品系列包括超過150種高度純化和充分表征的蛋白質(zhì)，包括酶原，酶，輔因子和抑制劑，以及單克隆和多克隆抗體的互補(bǔ)系列。還可提供因子缺乏的等離子體和定制的血液采集管，用于臨床研究。提供的服務(wù)包括定制蛋白質(zhì)純化，蛋白質(zhì)修飾，化驗(yàn)開發(fā)，合同制造和合同研究。

haemtech HCT-0020說明書

Thrombin (alpha)

凝血酶（alpha）

凝血酶原
的蛋白水解活化絲氨酸蛋白酶α-凝血酶通過酶原激活凝血酶原而產(chǎn)生。酶復(fù)合物凝血酶原酶催化凝血酶原中兩個(gè)肽鍵的蛋白水解，產(chǎn)生NH2末端衍生的F1.2區(qū)和異二聚體α-凝血酶。α-凝血酶由“A”鏈（Mr = 6000）組成，其通過單個(gè)二硫鍵與“B”鏈（Mr = 31,000）共價(jià)連接。

 HCT-0020 人類α-凝血酶

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 HCT-DFP 人類α-凝血酶，

 HCT-FPRCK 人類α-凝血酶，PPACK（FPRck）活性位點(diǎn)被阻止

 HCT-BFPRCK 人α-凝血酶，生物素化PPACK（FPRck）活性位點(diǎn)阻斷

 BCT-1020 牛α-凝血酶

 BCT-DFP 牛α-Thrombin，

 BCT-FPRCK 牛α-凝血酶，PPACK（FPRck）活性位點(diǎn)被阻止

 BCT-BFPRCK 牛α-凝血酶，生物素化PPACK（FPRck）活性位點(diǎn)封閉

 MCT-5020 小鼠α-凝血酶

α-凝血酶是通過酶原凝血酶原的蛋白水解活化產(chǎn)生的高度特異性絲氨酸蛋白酶（1）。在凝血期間，凝血酶裂解纖維蛋白原以形成纖維蛋白，導(dǎo)致凝血的終步驟，形成纖維蛋白凝塊。凝血酶還負(fù)責(zé)反應(yīng)激活因子V因子和因子VIII。據(jù)報(bào)道，凝血酶還激活因子XIII和血小板，并且還起血管收縮蛋白的作用。凝血酶的促凝血活性以兩種方式停止：1）通過肝素輔助因子II或抗凝血酶III /肝素復(fù)合物抑制; 或2）與血栓調(diào)節(jié)蛋白形成復(fù)合物。凝血酶/血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物的形成導(dǎo)致凝血酶不能切割纖維蛋白原并激活因子V和VIII，

凝血酶是由NH2-末端“A”鏈（Mr = 6,000）和COOH-末端“B”鏈（Mr = 31,000）組成的雙鏈酶，其通過單個(gè)二硫鍵保持共價(jià)結(jié)合。人凝血酶比牛凝血酶短13個(gè)氨基酸，這是由于人蛋白上的凝血酶切割位點(diǎn)不存在于牛蛋白中。

凝血酶還用于細(xì)菌中表達(dá)的融合蛋白的位點(diǎn)特異性切割（9-11）。凝血酶敏感位點(diǎn)摻入目的重組蛋白和促進(jìn)純化和/或表達(dá)的肽或蛋白質(zhì)之間。通過用凝血酶切割，從表達(dá)的雜交體釋放靶蛋白。然后可以通過親和層析容易地除去凝血酶。

使用如Nesheim等人所述的Lundblad程序（1）的修改，由純化的凝血酶原制備人，牛和小鼠凝血酶。（2）。凝血酶以50％（vol / vol）甘油/ H2O供應(yīng)，應(yīng)儲存在-20oC。通過SDS-PAGE分析確定純度，并在凝血酶特異性凝固測定中測量活性，并與標(biāo)準(zhǔn)化的NIH凝血酶進(jìn)行比較。凝血酶也可用活性位點(diǎn)用DFP，F(xiàn)PRck或生物素化的FPRck阻斷。

融合蛋白的切割
除了在凝血研究中的廣泛應(yīng)用外，凝血酶還可用于融合蛋白的位點(diǎn)特異性切割。凝血酶敏感位點(diǎn)摻入目的重組蛋白和促進(jìn)純化和/或表達(dá)的肽或蛋白質(zhì)之間。通過用凝血酶切割，從表達(dá)的雜交體釋放靶蛋白。然后可以通過親和層析容易地除去凝血酶。批次一致性確保每次都可重現(xiàn)的結(jié)果。對于涉及細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)，請與我們聯(lián)系，討論用于細(xì)胞培養(yǎng)的定制低內(nèi)毒素批次。

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