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上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司

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Glycotech 平行板流室操作說明書

2018-4-3  閱讀(1465)

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提  供  商 上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司 資料大小 3.6MB
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世界*實(shí)驗(yàn)材料供應(yīng)商 GlycoTech正式授權(quán)上海起發(fā)為其中國代理, GlycoTech在一直是行業(yè)的*,一直為廣大科研客戶提供zui為的產(chǎn)品和服務(wù),上海起發(fā)一直秉承為中國科研客戶帶來的產(chǎn)品,的服務(wù),簽約 GlycoTech就是為了給廣大科研客戶帶來更加完善的產(chǎn)品和服務(wù),您的滿意將是我們zui大的收獲

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GlycoTech始建于1991年,是美國國內(nèi)的專注于糖復(fù)合物生物功能和醫(yī)療應(yīng)用研究的生物公司。該公司建立有自己的研究項(xiàng)目,并開發(fā)了大量知識產(chǎn)權(quán)組合。另外,利用多年來發(fā)展的產(chǎn)品業(yè)務(wù),GlycoTech建立了zui大的稀有糖類試劑和相關(guān)技術(shù)的數(shù)據(jù)庫之一。

GlycoTech在過去的六年中一直與諾華制藥公司(Novartis)維持著企業(yè)合作關(guān)系,目的在于共同開發(fā)一類可作為強(qiáng)效拮抗劑的糖配體小分子模擬物,這些模擬物能抑制移植誘導(dǎo)的再灌注損傷中發(fā)生的血液淋巴細(xì)胞的異常外滲現(xiàn)象。近期與Chiron公司簽訂了許可協(xié)議,允許其范圍銷售Glycotech專有的以抗糖類腫瘤標(biāo)記物為基礎(chǔ)的癌癥診斷方面的產(chǎn)品。不僅如此,與國家衛(wèi)生研究院,賓夕法尼亞大學(xué),羅徹斯特大學(xué)和芝加哥神經(jīng)外科和神經(jīng)學(xué)科研研究院的合作項(xiàng)目也逐一得到開展。

GlycoTech正積極尋找其他的制藥合作公司,可著重提供糖生物領(lǐng)域的一系列專業(yè)技術(shù)。GlycoTech公司的結(jié)構(gòu)和發(fā)展策略都非常適合合作者快速得到*的專業(yè)知識,并且可以避免承擔(dān)因公司內(nèi)部發(fā)展引發(fā)固有財政責(zé)任的相關(guān)義務(wù)。

 

 

 

平行板流動室中的動態(tài)流動分析

流動檢測可以在明確的壁面切應(yīng)力下觀察細(xì)胞粘附。細(xì)胞粘附的不同事件的可視化可以通過選擇性圖像采集和隨后的圖像處理來量化。流動測定法特別適合于研究粘附事件,該事件在比大多數(shù)靜態(tài)粘附測定法更短的時間范圍內(nèi)發(fā)生得非常快。另外,可以研究初始事件之后的事件,例如細(xì)胞穩(wěn)定和擴(kuò)散,從而給出特定細(xì)胞 - 細(xì)胞或細(xì)胞 - 基底粘合劑行為的動力學(xué)的一些洞察。

 材料:

顯微鏡:

 

倒相顯微鏡配置為相襯和熒光操作

物鏡(6.3 x,10 x,40 x)

階段孵化器

生物:

 

細(xì)胞懸液(嗜中性粒細(xì)胞,癌細(xì)胞)

在35mm培養(yǎng)皿中的細(xì)胞單層或涂覆的基質(zhì)

粘附介質(zhì)(含有12mM Hepes的無血清培養(yǎng)基)

纖連蛋白(人血漿)

牛血清白蛋白(BSA)

流室系統(tǒng):

 

帶密封墊和管件的流量室甲板

35毫米組織培養(yǎng)皿

哈佛注射泵

適用于泵的玻璃注射器(3,5,20或60 cc)

硅橡膠管

旋塞

真空泵

電腦/電子:

 

數(shù)字圖像采集和處理系統(tǒng)

顯示器

錄像機(jī)

帶控制器的CCD相機(jī)

時間日期發(fā)生器

計(jì)算機(jī)與圖像系統(tǒng)的接口

存儲設(shè)備的圖像

 

操作過程:

一、細(xì)胞單層制備

1.通過向每個培養(yǎng)皿中加入1ml5.5μg/ ml FN溶液來涂覆人纖連蛋白(FN)培養(yǎng)皿。

2.孵育30分鐘。在室溫下。

3.從每道菜中吸出溶液。

4. 根據(jù)達(dá)到匯合所需的時間,以0.5-3.0×10 5個細(xì)胞/ ml的接種密度向每個培養(yǎng)皿中加入2ml細(xì)胞懸浮液(Huvecs,CHO細(xì)胞)。

5. 1-5天后,在流動測定中使用具有融合單層的培養(yǎng)皿。飼養(yǎng)細(xì)胞每2-3天,但通常不48小時。的流量測定。

二、涂層基板制備

1.用標(biāo)記筆在每個盤的中心劃出用于涂布基材的涂布區(qū)域(5mm直徑)。

2.加入20μl含10μg/ ml濃度底物的溶液至涂層區(qū)域。孵育1小時。

3.吸出液體,加入20μl1%BSA封閉1小時。

4.吸走BSA,加入20μl抑制劑1小時。

5.菜肴已準(zhǔn)備好用于流動測定。

三、使用平行板流動室的流動分析

1.打開階段培養(yǎng)箱和溫?zé)嵴澈辖橘|(zhì)至37°C 1小時。在開始流動測定之前。

2.將進(jìn)口,出口和真空管路連接到流動室甲板上的流動系統(tǒng)裝置。用介質(zhì)填充系統(tǒng)并去除系統(tǒng)中的所有空氣。

3.用細(xì)胞懸液填充入口儲液器。對于使用細(xì)胞單層的測定,推薦10 6個 細(xì)胞/ ml。對于涂布的底物測定,使用10 5個細(xì)胞/ ml。

4.通過倒轉(zhuǎn)甲板將碟子安裝到流動室甲板上,在流道區(qū)域放置一小塊培養(yǎng)基,然后將35毫米培養(yǎng)皿放在甲板上。真空將在甲板上舉行。確保碟子在流路中沒有氣泡。

5.將組裝好的腔室放在顯微鏡臺上。

6.啟動細(xì)胞的流式細(xì)胞注射器連接在0.1-4.0達(dá)因/厘米的范圍內(nèi)的剪切應(yīng)力至出口流動室泵2。

7.讓細(xì)胞流動足夠的時間以獲得足夠數(shù)量的細(xì)胞與細(xì)胞單層或涂布的表面相互作用。一般3-10分鐘。用來。

8.開始圖像采集。在盤子上7-10個位置收集圖像。通常,在給定實(shí)驗(yàn)條件下的3個盤子提供足夠的數(shù)據(jù)以顯示處理之間的統(tǒng)計(jì)差異。

9.在所有盤上獲取圖像后,執(zhí)行圖像分析以量化流動測定。

 

 

 

 

貨號

品名

規(guī)格

目錄價

品牌

31-001

Circular Flow Chamber Kit

1 kit

10,800

Glycotech

 

 

我們公司zui大優(yōu)勢是強(qiáng)大的采購,

1:基本什么都能進(jìn)口,血清,抗體,耗材,還有部分限制進(jìn)口的,

2:貨品全,現(xiàn)經(jīng)營過700多個品牌,基本所有生物試劑耗材都可以進(jìn)口,特別是冷偏的產(chǎn)品那就更有優(yōu)勢,

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