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上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司
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immaginabiotech AHARIBO 6 RXN簡(jiǎn)介
immaginabiotech AHA003_6
平行分離和下游分析翻譯的 RNA（通過(guò) RNA-seq 或 qPCR）和新合成的蛋白質(zhì)。
三個(gè)兼容模塊包括用于 RNA 分析的模塊 1、用于蛋白質(zhì)組分析的模塊 2 和用于蛋白質(zhì)印跡制備的模塊 3。
immaginabiotech AHA003_6應(yīng)用：
-翻譯組分析
- 從頭蛋白質(zhì)組分析
-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄組學(xué)
請(qǐng)注意，AHARIBO 將在 +4°C 時(shí)分裝在兩個(gè)單獨(dú)的盒子中運(yùn)輸。
常見(jiàn)問(wèn)題解答：
我可以在動(dòng)物模型中使用AHARIBO嗎？
不，AHARIBO致力于細(xì)胞培養(yǎng)。AHA與新生肽的結(jié)合對(duì)該方案至關(guān)重要。盡管原則上可以在活體動(dòng)物中加入AHA（Sarah Calve et al.Sci Rep.2016；6:32377）在這個(gè)階段，我們不建議在動(dòng)物或活生物體中研究AHARIBO。
我不小心把珠子凍住了，我還能用嗎？
對(duì)通常，不建議凍結(jié)珠子，但不應(yīng)影響珠子的特性。
在繼續(xù)溶解之前，我需要用sBlock處理細(xì)胞嗎？
是的，必須將sBlock添加到細(xì)胞中，以阻止翻譯，并將新生肽固定在核糖體上，這是AHARIBO的關(guān)鍵步驟。sBlock也存在于試劑盒中的裂解緩沖液（LB）和W緩沖液（WB）中。如果錯(cuò)誤地跳過(guò)細(xì)胞與sBlock的孵育，裂解緩沖液中的sBlock將穩(wěn)定核糖體上的新生肽。
我應(yīng)該如何儲(chǔ)存用于AHARIBO實(shí)驗(yàn)的裂解物？
我們建議在80°C至80°C的溫度下儲(chǔ)存，最多1個(gè)月。
我沒(méi)有足夠的時(shí)間在一天內(nèi)完成所有步驟。我可以存儲(chǔ)功能化珠子（在步驟1之后）并稍后繼續(xù)嗎？
是的，你可以在第一步停下來(lái)。我們建議將珠子保持在+4°C過(guò)夜。不要冷凍珠子。
可以使用什么樣的輸入材料？
我們建議從對(duì)應(yīng)于0.2 a.u.（260 nm）的總體積的裂解液開(kāi)始。另一方面，我們測(cè)試了AHARIBO RNA，HeLa裂解物吸光度降至0.002 a.u.我如何計(jì)算吸光度？
您只需在260 nm處以溶解緩沖液為空白測(cè)量納米滴處的溶解液，并使用該吸光度值計(jì)算所需的體積。一個(gè)實(shí)際的例子是，如果你的裂解液的吸光度（A260）對(duì)應(yīng)于10，這意味著你有10個(gè)A.u./mL，然后對(duì)應(yīng)于0.01 A.u./µL。因此，如果你想從0.2 A.u開(kāi)始，需要20µL的裂解液。
在AHARIBO試劑盒中處理之前，有沒(méi)有辦法改進(jìn)我的樣品？
可以使用標(biāo)準(zhǔn)方案清潔樣品，以減少細(xì)胞裂解物。這將去除全長(zhǎng)合成蛋白質(zhì)，豐富含有新生鏈的核糖體部分。
我可以為哪一種物種使用AHARIBO？
一般來(lái)說(shuō)，AHARIBO在真核核糖體上效果良好，但到今天為止，它已在哺乳動(dòng)物細(xì)胞和小鼠體內(nèi)得到驗(yàn)證。sBlock是真核生物*的翻譯抑制，不適用于原核生物。
