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上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司
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ALSTEM是一家位于灣區(qū)的早期生物技術(shù)公司，擁有快速擴(kuò)展的產(chǎn)品和服務(wù)組合，為生物制藥和學(xué)術(shù)機(jī)構(gòu)提供服務(wù)。受到加利福尼亞干細(xì)胞研究承諾的啟發(fā)，ALSTEM于2012年由具有iPS細(xì)胞重編程和基因組編輯技術(shù)專業(yè)知識(shí)的科學(xué)家創(chuàng)立。
hTERT Cell Immortalization Kit: #CILV02
hTERT細(xì)胞永生化試劑盒：＃CILV02
描述
*，原代細(xì)胞僅在培養(yǎng)中經(jīng)歷預(yù)定的和有限數(shù)量的細(xì)胞分裂。在有限的群體倍增（其數(shù)量因物種，細(xì)胞類型和培養(yǎng)條件而異）之后，原代細(xì)胞進(jìn)入一種狀態(tài)，即所謂的復(fù)制衰老，它們不再分裂。為了超越衰老，存在幾種使培養(yǎng)中的哺乳動(dòng)物細(xì)胞永生化的方法。近發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞永生化方法是通過端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶蛋白（TERT）的表達(dá)。它對(duì)受端粒長(zhǎng)度影響大的細(xì)胞特別有用，包??括許多人類細(xì)胞類型。這種蛋白質(zhì)通常在大多數(shù)體細(xì)胞中沉默。當(dāng)外源引入hTERT時(shí)，這些細(xì)胞能夠通過維持足夠的端粒長(zhǎng)度來避免復(fù)制性衰老。
產(chǎn)品名稱 | hTERT細(xì)胞永生化試劑盒 |
目錄 ＃ | CILV02 |
尺寸 | 5 x20μl |
運(yùn)輸 | 干冰 |
儲(chǔ)存和穩(wěn)定性 | 儲(chǔ)存在-80°C（穩(wěn)定長(zhǎng)達(dá)6個(gè)月）。 |
質(zhì)量控制 | 包裝的慢病毒構(gòu)建體作為冷凍的VSV-G假型病毒顆粒提供。通過Clontech的Lenti-X qRT-PCR滴定試劑盒（Cat。＃631235）測(cè)量慢病毒的滴度。每批細(xì)胞永生化試劑盒在成纖維細(xì)胞中進(jìn)行功能測(cè)試。 |
限制使用 | 僅供研究使用。不得用于診斷或治療程序。 |
- 概觀
用含有hTERT的重組慢病毒感染細(xì)胞，用嘌呤霉素篩選產(chǎn)生自己的永生化細(xì)胞
- 程序
- 將靶細(xì)胞以1-2×10 5個(gè)細(xì)胞/孔的密度鋪在6孔板的一個(gè)孔中。
- 第二天，將濃縮的重組慢病毒在37℃水浴中解凍，并在解凍時(shí)立即將其從浴中取出。
- 在4μlTransPlus試劑（ALSTEM，目錄號(hào)V050）存在下，用4-20μl/孔上清液感染6孔板中的靶細(xì)胞。
注意：TransPlus試劑是一種聚陽(yáng)離子，可中和電荷相互作用，從而增加假病毒衣殼與細(xì)胞膜之間的結(jié)合。 - 第二天，去除病毒上清液并將適當(dāng)?shù)?生長(zhǎng)培養(yǎng)基加入細(xì)胞中并在37℃下孵育。
- 孵育72小時(shí)后，將細(xì)胞繼代培養(yǎng)到2×100mm培養(yǎng)皿中并加入適量的嘌呤霉素以穩(wěn)定細(xì)胞系產(chǎn)生。
- 選擇后10-15天，挑選克隆進(jìn)行擴(kuò)增，篩選陽(yáng)性克隆。
注意：解凍后，我們建議不要將上清液再次冷凍以備將來使用，因?yàn)椴《镜味葧?huì)顯著下降
貨號(hào) | 品名 | 規(guī)格 | 品牌 |
VB100 | ViralBoost | 1毫升 | alstembio |
VC100 | 慢病毒沉淀解決方案 | 100毫升/ 250毫升/ 500毫升 | alstembio |
V020 | TransPlus™病毒轉(zhuǎn)導(dǎo)增強(qiáng)劑 | 100μl/500μl | alstembio |
CILV02 | hTERT細(xì)胞永生化試劑盒 | 5 x20μl | alstembio |
上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司是實(shí)驗(yàn)試劑一站式采購(gòu)服務(wù)商
1：強(qiáng)大的進(jìn)口輻射能力，血清、抗體、耗材、大部分限制進(jìn)口品等。
2：產(chǎn)品種類齊全，經(jīng)營(yíng)超過700多品牌，基本涵蓋所有生物實(shí)驗(yàn)試劑耗材。
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