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ELISA試劑盒SCI文章的原理和類型介紹
點(diǎn)擊次數(shù)：1088 發(fā)布時(shí)間：2018-1-17
1.1.ELISA試劑盒SCI文章的原理
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測定時(shí)，受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測定方法達(dá)到很高的敏感度。
1.2. ELISA試劑盒的類型
ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。在這種測定方法中有三個(gè)必要的試劑：（1）固相的抗原或抗體，即"免疫吸附劑"（immunosorbent）;（2）酶標(biāo)記的抗原或抗體，稱為“酶聯(lián)物”、“結(jié)合物”（conjugate）;（3）酶反應(yīng)的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的情況以及檢測的具體條件，可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測方法。用于臨床檢驗(yàn)的ELISA主要有以下幾種類型：
雙抗體夾心法是檢測抗原zui常用的方法，操作步驟如下：
1） 將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié)，形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。
2） 加受檢標(biāo)本，保溫反應(yīng)。標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。
3） 加酶標(biāo)抗體，保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。*洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān)。
4） 加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過比色，測知標(biāo)本中抗原的量。
在臨床檢驗(yàn)中，ELISA試劑盒SCI文章此法適用于檢驗(yàn)各種蛋白質(zhì)等大分子抗原，例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要獲得針對受檢抗原的異性抗體，就可用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物而建立此法。如抗體的來源為抗血清，包被和酶標(biāo)用的抗體分別取自不同種屬的動(dòng)物。如應(yīng)用單克隆抗體，一般選擇兩個(gè)針對抗原上不同決定簇的單抗，分別用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物。這種雙位點(diǎn)夾心法具有很高的特異性，而且可以將受檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗體一起保溫反應(yīng)，作一步法檢測。
250克 NLN Medium 用于植物組織培養(yǎng) NLN培養(yǎng)基
250克 Mycoplasma Agar Base 用于支原體的分離培養(yǎng) 支原體瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基
250 Corn Meat Medium 用于真菌培養(yǎng) 玉米粉瓊脂
250 Sabouraud’s Agar 用于真菌檢測(GB標(biāo)準(zhǔn)) 沙氏瓊脂培養(yǎng)基
250 Sabouraud BHI Agar 用于真菌檢測(Acumedia 方法) 沙氏BHI瓊脂
250 Sabouraud’s Agar，Modified 用于真菌檢測 改良沙氏瓊脂培養(yǎng)基
250克 Sabouraud′s Agar 用于真菌檢測 沙氏瓊脂培養(yǎng)基
250 Littman Agar 用于真菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法) Littman 瓊脂
250 Liquid Sabourand Medium 用于真菌、酵母菌增菌 液體沙氏培養(yǎng)基
ELISA試劑盒SCI文章