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技術文章

自動細胞計數(shù)儀選購指南(一)[選購寶典]

點擊次數(shù):5494 發(fā)布時間:2016-3-16

    除非你像猴哥那般火眼金睛,否則,利用血球計數(shù)板來數(shù)細胞是一件痛苦的事情。浪費時間不說,關鍵是不準確,重復性也不好。若是有多個樣本,那真是讓人發(fā)瘋。這時,自動細胞計數(shù)儀應運而生,帶來了更更準確的細胞計數(shù)。
    市場上有多個品牌的細胞計數(shù)儀,乍一看,好像都是經(jīng)典三步曲:上樣-插入-分析。如何選擇一臺的細胞計數(shù)儀,小編來給你支兩招,讓你只選對的,不選貴的。首先,想一想平時主要對哪些細胞計數(shù),它們的大小在什么范圍;其次,你需要什么樣的細胞信息以及通量水平;你們實驗室打算將多大一塊地方奉獻給細胞計數(shù)儀;zui后,你打算花多少錢。
    市場上大部分細胞計數(shù)儀都是基于染料,以臺盼藍為主,也有碘化丙啶(PI)。正常的健康細胞能夠排斥臺盼藍,而當細胞損傷或死亡時,臺盼藍可穿透變性的細胞膜,與DNA 結合,使其著色,從而區(qū)分出活細胞和死細胞。有些細胞計數(shù)儀是基于電阻抗法,更簡便,不需要使用臺盼藍染料,但也無法分辨活細胞與死細胞。

    首先為你介紹兩款熱門的細胞計數(shù)儀。之后,哈爾濱德遠科技開發(fā)有限公司還將介紹一些便攜式的細胞計數(shù)儀和高通量的儀器,囊括了市場上近期推出的大部分細胞計數(shù)儀。我們將提供詳細的參數(shù)對比和特性介紹,以便您在選購儀器時能夠方便地參考。
TC20自動細胞計數(shù)儀(Bio-Rad)
這款細胞計數(shù)儀是由Bio-Rad公司推出的。它的計數(shù)流程很簡單,就是“上樣-插入-結果”。首先將樣品上樣到計數(shù)玻片上,然后將玻片插入TC20細胞計數(shù)儀,計數(shù)自動開始,30秒內總細胞數(shù)和活細胞數(shù)就顯示在屏幕上。儀器對細胞濃度的要求為5 x 104 -1 x 107 細胞/ml。計數(shù)只需要10 µl懸浮或重懸的細胞,讓珍貴樣品得以保留。玻片上有兩個室,每次能對2個樣品進行計數(shù)。
有些細胞計數(shù)儀通過單個焦點平面來評估細胞活力,這樣得到的結論可能不太準確,而TC20細胞計數(shù)儀對多個平面的每個樣品進行打分。*的自動對焦技術和圖像分析算法在30秒內提供了準確且重復性高的細胞數(shù)量。Bio-Rad的產(chǎn)品認為這對于評估細胞活性尤為重要,因為焦點的差異可能顯著影響結果。
TC20系統(tǒng)所能接受的細胞大小是6-50 µm,適合哺乳動物細胞及一些更小的生物,如浮游生物和孢子等。若你正在使用Bio-Rad的Bio-Plex系統(tǒng),那么還可以利用TC10對Bio-Plex的磁珠進行計數(shù)。
TC20能夠提供下列結果:活細胞和死細胞濃度,總細胞濃度,細胞存活率,細胞的平均大小,細胞圖像。通過USB接口,研究人員能導出帶注釋的JPEG圖像文件,用于進一步的分析,或下載計數(shù)的數(shù)據(jù)。當然,結果也能夠打印出來。 
當然,光是一臺儀器還不夠,你還需要耗材和相關配件。TC20的耗材有TC20計數(shù)玻片、TC20臺盼藍、TC20系統(tǒng)驗證試劑盒,另外,你還可以選擇TC20熱敏打印機。據(jù)Bio-Rad介紹,TC20計數(shù)玻片也是很*的,無論用戶的移液習慣如何,它都能讓樣品均勻分布,帶來準確重復的結果。這一點很重要,試想一下,如果有的地方?jīng)]有樣品,那么就會影響計數(shù)準確性。
Countess 自動細胞計數(shù)儀(Life Technologies)
2008年,Life Technologies(當時還是Invitrogen)推出了這款細胞計數(shù)儀。它的基本參數(shù)與TC20大致相同,也是利用臺盼藍染色和圖像分析算法,在30秒內給出準確的細胞和活性計數(shù)。每次的樣本量也是2個,每次需要10 ul,只是可分辨的細胞大小略有不同,在5-60 um。細胞濃度范圍應在1×104-1×107 細胞/ml,在1×105-4×106 細胞/ml。
據(jù)Life Technologies介紹,Countess細胞計數(shù)儀的一個*之處在于其gating功能,能夠根據(jù)細胞大小分辨混合群體中的細胞。在對某一混合群體計數(shù)后,用戶隨后可保存特定的參數(shù)組,以便未來計數(shù)。此特征對于干細胞或原代細胞特別有用,讓用戶能夠排除細胞碎片和滋養(yǎng)層細胞。
有時,細胞會成團,使得細胞數(shù)量被低估,或細胞大小被高估,Countess細胞計數(shù)儀能夠準確分辨zui多5-6個細胞的細胞團。
至于儀器的清潔和維護,也非常簡單。Countess計數(shù)儀已經(jīng)預先校準過了。如果你升級了儀器的固件,就需要校準。另外,如果你換用另一個牌子的臺盼藍或臺盼藍濃度與以前不同,那也應該重新校準。校準只需要2-3分鐘即可。除此之外,就沒有必要校準了。
點評:這兩款自動細胞計數(shù)儀在參數(shù)上不相伯仲,只有細胞大小方面的微小差異。TC20的特別之處在于多平面對焦分析,而Countess則有gating功能?,F(xiàn)在*未知的就是價格了,用戶可根據(jù)報價再做打算。


 

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