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研域(上海)化學(xué)試劑有限公司

ELISA試劑盒的操作步驟

時間:2015-9-4閱讀:815

     在人ELISA試劑盒中一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下倒置混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只要待血清天然凝固、血塊收縮后即可取得。也可在板孔中加入稀釋液,再在其加入血清標(biāo)本,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。
      一般說來,在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃,超過一周測定的需低溫冰存??捎米魅?strong>ELISA試劑盒測定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清 )、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體 或抗原成份,ELISA試劑盒中本次試驗不需用的部分應(yīng)及時放回冰箱保留。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)留意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時會開釋出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中,溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。如在冰箱中保留過久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。本文將敘述板式ELISA各個的留意要點,珠式、管式及磁性球人ELISA試劑盒,國外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用,嚴(yán)格遵照劃定操縱,必能得出正確的結(jié)果。加樣時應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并留意不可濺出,不可產(chǎn)氣憤泡。有此測定(如間接法ELISA)需用稀的血清,可在試管中按劃定的稀釋度稀釋后再加樣。 
    操縱因固相載體的形成不同而有所差異,海內(nèi)醫(yī)學(xué)檢修一般均用板式點。除特殊情況外,在醫(yī)學(xué)檢修中均以血清作為檢測標(biāo)本。加酶結(jié)合物應(yīng)用液和底物用液時可用定量多道加液器,人ELISA試劑盒使加液過程迅速完成。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。每次加標(biāo)本應(yīng)更換吸嘴,以發(fā)生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加樣。

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