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低壓液相分離層析儀實際操作連接(蛋白質(zhì)純化分離實驗)

閱讀:4387      發(fā)布時間:2010-6-8
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蛋白質(zhì)純化分離實驗(本人長期安裝各高校低壓液相分離層析裝置所得經(jīng)驗,以簡單文字闡述,共大家參考,如需詳細了解可咨詢本)
層析柱
:基本原理:層析柱起到分離的作用,并且還可以加樣品。
連接:在實驗中,支架先將層析柱固定好,上面進口與恒流泵的左邊管相連,下面出口與核酸蛋白的下管進口相連(連接部可加一塑料軟管)
核酸蛋白檢測儀:基本原理:檢測范圍:10個毫譜;T為透光度,A為光敏度,樣品濃度越高需求靈敏度就要調(diào)的越高,波長選擇上,214為糖,254為核酸,280為蛋白。
連接:下管進口連接層析柱,上管出口連接部分收集器,后面連接記錄儀或電腦(有時連電腦需要采集儀)
調(diào)試:先將T調(diào)到100,在將A調(diào)到0,根據(jù)不同的實驗選擇不同的波長
記錄儀:記錄儀左邊紙上記錄靈敏度,右邊記錄透光度
           連接:連接核酸蛋白檢測儀
           調(diào)試:首先,擴展彈起、3按下(3為著紙速度,值調(diào)越大,著紙越快越明顯)、停止上的按鈕按下,然后,將核酸蛋白檢測儀上的T調(diào)100,在記錄儀上按下調(diào)零按鈕,zui后通過記錄儀上的旋轉(zhuǎn)調(diào)零按鈕調(diào)零即可
恒流泵:基本原理:避免空氣進入,加減實驗速度
           連接:左邊出水管連接層析柱的上面進水口,右邊進水管放入樣品中
部分收集器:選擇1分鐘即1分鐘收集一個管子
低壓液相分離層析儀實際操作連接(蛋白質(zhì)純化分離實驗)

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