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抗體稀釋液和ELISA相關(guān)溶液的配制

時間：2010/2/21閱讀：4430
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抗體稀釋液和ELISA相關(guān)溶液的配制

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1、抗體或免疫球蛋白稀釋液0.01mol/L pH7.2PBS
　 

　NaH2PO4·2H2O

0.39克

Na2HPO4

1.27克

NaCl

0.85克

NaN3

200mg

H2O（蒸餾水）

至    1000ml

2、ELISA洗液及HRP標(biāo)記抗體稀釋液PH7.4，PBST 

NaCl

2.0克

KH2PO4

0.2克

Na2HPO4·12H2O

2.9克

KCl

0.2克

NaN3

0.2克

H2O

至    1000ml

吐溫（Tween）20

0.5ml

  4°C保存?zhèn)溆?/font>

3、包被液（簡稱CB）pH9.6  

Na2CO3

1.59克

NaHCO3

2.93克

NaN3

0.2克

H2O

至    1000ml

  密封蓋好，4°C存放備用

4、ELISA底物液（可溶性底物）
  

磷酸-檸檬酸緩沖液pH5.0

　

0.1mol/L檸檬酸（21.014克/100ml）

24.3ml

0.2mol/L Na2 HPO4（28.4克/1000ml）

25.7ml

H2O

50ml

  4°C存放備用

5、DAB底物液（不溶性底物，組化病理等）
　 

0.05mol/L pH7.6  Tris-HCL

　

Tris

6.05克

HCL（36%）

3.15克（約2.7ml濃HCL）

H2O

至                            1000ml

DAB為3´，3´二氧基聯(lián)苯胺，不溶性底物，呈棕紅色

6、DAB溶液配制：（組化及Western blot 顯色）
 稱DAB30mg，用0.05mol/L pH7.6Trs-HCL緩沖液100ml溶解,如有沉淀，過濾后使用，一般新鮮配制使用。用前加入1%H2O2 1-1.5ml,H2O2濃度為0.01%，混均后使用。 7、3´，3´，5´，5´，-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）溶液配制：
 用二甲基甲酰胺（dimethylformamide，DMF）或無水乙醇，將TMB配成1%濃度，4°C保存半年以內(nèi)使用。使用前，用pH5.0磷酸-檸檬酸底物液9.9ml加入0.1ml（1mg/TMB）1%TMB液，再按每毫升TMB加入30%的H2O2 1ul，混勻后立即使用。2N H2SO4終止后，450nm測定OD值。 

8、1%離子瓊脂膠配制液
    作免疫雙相擴散，單相擴散及免疫電泳中使用。
   0.05UpH8.6巴比妥鈉-HCL緩沖液 　

巴比妥鈉

23.8克

1mol/L HCL

34.5ml

H2O

2150ml


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